- 标题
- 摘要
- 关键词
- 实验方案
- 产品
-
细胞因子激活和氧化应激对人胚胎干细胞来源的视网膜色素上皮细胞功能的影响
摘要： 目的：在年龄相关性黄斑变性（AMD）等多种视网膜并发症中，氧化应激水平升高且细胞因子浓度增加。这些因素已被证实会改变原代及永生化视网膜色素上皮（RPE）细胞中基质金属蛋白酶（MMP）的激活与表达。然而，其对人胚胎干细胞（hESC）来源的RPE细胞的影响尚不明确。 方法：将成熟hESC-RPE细胞分别暴露于炎症细胞因子（IFN-γ或TNF-α）24小时或氧化应激（H2O2）1小时。通过跨上皮电阻（TEER）分析屏障功能变化；采用实时定量逆转录聚合酶链反应检测MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、I型胶原和IV型胶原基因表达；利用蛋白质印迹法或ELISA分别检测MMP-1和MMP-3蛋白表达；并通过明胶酶谱法分析MMP-2和MMP-9蛋白的激活与分泌情况。 结果：正常状态下，成熟hESC-RPE细胞低水平表达MMP-1、-2、-3和-9基因。肿瘤坏死因子-α可上调MMP-1和-2基因表达，而H2O2则上调MMP-3和-9基因表达。明胶酶谱显示IFN-γ和TNF-α诱导MMP-2及高分子量MMP（HMW MMP）分泌，但H2O2会抑制其分泌。此外，TNF-α和H2O2显著降低屏障功能。 结论：本研究表明细胞因子可诱导MMP-1和-2的基因及蛋白表达，而H2O2仅诱导MMP-3和-9基因表达但不促进其蛋白分泌。这些数据提示，在氧化应激和细胞因子刺激下，成熟hESC-RPE细胞在MMP分泌与表达方面与其在人眼中的天然对应物相似，可用于体外模拟涉及MMP活性改变的视网膜疾病（如AMD、糖尿病视网膜病变或增生性玻璃体视网膜病变）。
关键词： 基质金属蛋白酶、MMP、干细胞、视网膜色素上皮
更新于2025-11-21 11:08:12
-
酶响应性多功能肽包被的金纳米棒可提高肿瘤靶向性和光热治疗效果
摘要： 众所周知，隐形涂层能有效延长纳米材料在血液中的循环时间，这虽有利于全身递送，但同时也限制了其细胞内化，进而阻碍了高效的肿瘤靶向与富集。本研究通过开发一种能响应肿瘤微环境中过表达的基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的酶响应型两性离子隐形肽涂层来解决这一困境。该肽由细胞穿透Tat序列、MMP-9可切割序列和两性离子抗污序列组成。采用该涂层?；す馊冉鹉擅装簦ˋuNRs）后，我们发现响应型AuNRs既保持了令人满意的系统循环时间，又在肿瘤中显著增强了细胞摄取，从而在小鼠模型中明显提升了光热治疗效果。
关键词： Tat肽、光热疗法、金纳米棒、两性离子肽、MMP-9响应性
更新于2025-09-23 15:22:29
-
<i>VCAN</i>典型剪接位点突变与玻璃体视网膜变性相关并破坏基质金属蛋白酶（MMP）蛋白水解位点
摘要： 目的：为深入了解玻璃体视网膜变性的病理生理机制，本研究描述了三名Versican玻璃体视网膜病变（VVR）家系成员的临床病程，并对编码versican蛋白（VCAN）基因中的经典剪接位点突变进行了生化分析。 方法：通过回顾性病历分析、人眼组织病理学检查、Sanger DNA测序、蛋白质结构建模及体外蛋白水解实验进行研究。 结果：先证者（Ⅱ:1）、母亲（Ⅰ:2）及弟弟（Ⅱ:2）均出现黄斑保留型视网膜变性伴视网膜脱离和增生性玻璃体视网膜病变，组织病理学分析证实了这些特征。所有受累成员均携带杂合腺嘌呤至鸟嘌呤变异（c.4004-2A>G），该变异预计导致第8外显子跳跃或GAGb链起始端13个氨基酸缺失（VCAN p.1335-1347）。该缺失区域对应一个推测的MMP切割位点，通过荧光共振能量转移（FRET）蛋白水解实验证实。蛋白质组网络分析鉴定出人玻璃体和视网膜中与视网膜脱离及变性相关的10个互作蛋白。 结论：VVR可导致严重眼部疾病，包括视网膜脱离和视网膜营养不良。VCAN基因内含子突变移除了MMP切割位点，改变versican蛋白结构并引发异常玻璃体塑形。versican蛋白网络的破坏可能是临床病理特征的基础，这为靶向治疗提供了方向。
关键词： versican（多功能蛋白聚糖）, VCAN（versican基因）, extracellular matrix（细胞外基质）, MMP-2（基质金属蛋白酶-2）, genetics（遗传学）, erosive vitreoretinopathy（侵蚀性玻璃体视网膜病变）, retinal detachment（视网膜脱离）, gelatinase（明胶酶）, vitreous（玻璃体）, wagner disease（ Wagner综合征）, MMP-9（基质金属蛋白酶-9）
更新于2025-09-23 13:20:00