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利用时间门控荧光共振能量转移和杂交链式反应实现microRNA的简单、放大及多重检测
摘要: 杂交链反应(HCR)是一种简单灵敏的核酸检测方法。现有方案无法将免洗涤传感模式与低浓度下的多重靶标定量相结合,而这对溶液内及原位检测均具有重要价值。本研究将铽供体与染料受体间的时间门控荧光共振能量转移(TG-FRET)集成于HCR体系中,实现了对microRNAs(miR-20a与miR-21)及其DNA模拟物的多重检测。HCR-TG-FRET无需洗涤即可实现核酸定量,检测限低至240阿摩尔(1.7 pM)microRNA和123阿摩尔(0.88 pM)DNA。对高同源microRNAs的有效区分展现了卓越的靶标特异性。通过单次测量、单一激发波长及单个FRET配对实现多重检测,可在同一样本中同步定量30 pM至300 pM范围内的miR-20a与miR-21。HCR-TG-FRET在含血清与不含血清样本中性能相当,且无需使用RNase抑制剂。该技术显著提升了现有HCR方法的简便性、灵敏度与多重检测能力。即使在复杂生物环境中,HCR-TG-FRET仍展现出卓越的诊断性能,为先进核酸生物传感提供了重要优势。
关键词: miRNA、mRNA、荧光、诊断、DNA、生物传感
更新于2025-09-22 18:47:58
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窄带LED光源的发展及其在皮肤病学中的应用
摘要: 我们开发了一项以半导体LED为光源、通过带通滤波器获取超窄带光的技术。将该光源应用于人体毛发再生后,获得了有效的临床效果。分子生物学研究证实,超窄带LED照射能刺激人毛乳头细胞,引发mRNA表达及蛋白质生成。小鼠实验及人毛乳头细胞培养实验进一步从分子机制模型层面表明:具有高皮肤穿透性的超窄带红光LED照射对毛发生长有效;而穿透性较弱的超窄带绿光LED照射则对创伤愈合具有疗效。由此可见,以LED为光源的超窄带光技术不仅能深化上述研究,更有望推动光医学交叉领域发展,开拓新兴产业。
关键词: 毛发生长、激光二极管(LD)、人真皮乳头细胞、窄带发光二极管(NB-LED)、光源、mRNA、伤口愈合、带通滤波器
更新于2025-09-19 17:13:59
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单层MoS2纳米片与双荧光标记信号弹的快速、简便、无试剂且室温下的偶联,作为用于活细胞中TK1 mRNA比率检测的纳米探针
摘要: 直接将荧光标记的DNA分子(称为"信号弹")负载于金纳米颗粒(AuNPs)上,是实现靶标DNA分子细胞内成像的一种可控且简便的方法。然而,用信号弹修饰AuNPs需要繁琐耗时的步骤、额外试剂或富腺苷酸DNA分子。本研究开发了一种快速、简单、无需试剂且在室温下即可实现的策略,将双荧光标记信号弹修饰于单层二硫化钼纳米片(M-MoS2 NSs)表面,用于活细胞中TK1 mRNA的比例成像。通过将巯基化单链DNA(ssDNA)与6-羧基荧光素(FAM)和5-羧基四甲基罗丹明(TAMRA)标记的信号弹杂交制备双链体。纳米信号弹的制备是通过将形成的双链体共轭连接到M-MoS2 NSs表面的硫空位位点实现,整个制备过程可在1小时内完成。在纳米信号弹中,FAM与TAMRA保持距离导致荧光共振能量转移(FRET)效率低下。当存在完全匹配的DNA(DNApm)分子时,会诱导信号弹从纳米信号弹上释放。释放的信号弹折叠成发夹结构,使FAM向TAMRA产生高效FRET效率及显著的静态淬灭?;诟没疲擅仔藕诺狣NApm分子的比例检测提供了有效平台,其检测限(信噪比3)为8 nM,线性范围为25-500 nM。共聚焦显微镜实验表明,该纳米信号弹可用于HeLa和MCF-7细胞中TK1 mRNA的比例成像。
关键词: 比率传感、单层MoS2纳米片、TK1 mRNA、双荧光团标记的信号弹分子、活细胞
更新于2025-09-16 10:30:52
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紫外线B辐射会改变表皮皮肤和皮下脂肪组织中的昼夜节律时间
摘要: 最新研究发现,昼夜节律时间调控皮肤细胞功能,并可能影响对紫外线辐射(UVR)的防护。然而目前尚不清楚,通过皮肤的UVR是否直接影响昼夜节律基因的表达。我们研究了中波紫外线(UVB)照射对隐花色素昼夜节律钟1(CRY1)、隐花色素昼夜节律钟2(CRY2)和转录昼夜节律相关抑制因子(CIART)基因的影响。12名健康志愿者接受4个标准红斑剂量(SED)的窄谱UVB辐射。在UVB照射24小时后,从照射部位及10厘米外未照射部位通过穿刺活检获取表皮/真皮及皮下脂肪组织样本。采用RT-PCR(TaqMan法)检测CRY1、CRY2和CIART的基因表达。UVB辐射影响了表皮/真皮层和皮下脂肪组织的mRNA表达:使表皮/真皮层的CRY2基因表达下调,同时使皮下脂肪组织的CRY1和CIART基因表达上调。本研究首次证实UVB辐射会影响皮下脂肪组织中昼夜节律基因的表达。需进一步研究以阐明其具体机制。
关键词: 基因、CIART、mRNA、CRY2、CRY1
更新于2025-09-09 09:28:46