研究目的
开发一种以螺吡喃为光开关光敏剂的基因递送系统,用于实现可控的光化学内化效应,在提高基因递送效率的同时最小化光细胞毒性。
研究成果
该研究成功开发了一种以螺吡喃为光开关光敏剂的基因递送系统,该系统可实现可控的光化学内化效应,提高基因递送效率并降低光细胞毒性。该系统表现出可忽略的暗毒性和光毒性,最大转染效率达到91%。
研究不足
该研究仅限于体外应用,且需紫外线激活系统,可能因组织穿透性差而限制其体内应用。不过,采用近红外双光子光照射仍存在体内应用的潜力。
1:实验设计与方法选择:
本研究通过将含螺吡喃的聚合物组装到bPEI/DNA复合物外层构建三元聚阳离子复合物,并采用荧光共振能量转移(FRET)技术验证其形成。
2:样本选择与数据来源:
使用HeLa细胞进行体外转染研究,通过动态光散射(DLS)和透射电子显微镜(TEM)对聚阳离子复合物进行表征。
3:实验设备与材料清单:
设备包括Zetasizer纳米系列(Nano zs90,英国马尔文仪器公司)、透射电子显微镜(JEM-1011,日本电子株式会社)和共聚焦激光扫描显微镜(LSM 710,德国蔡司公司);材料包含含螺吡喃的阳离子共聚物PSP1和PSP2、支链聚乙烯亚胺(bPEI,25 kDa)及质粒DNA(pDNA)。
4:支链聚乙烯亚胺(bPEI,25 kDa)及质粒DNA(pDNA)。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:制备并表征聚阳离子复合物,评估细胞内活性氧生成及光细胞毒性,通过流式细胞术和荧光素酶实验测定体外转染效率。
5:数据分析方法:
流式细胞术数据采用FlowJo软件分析,凝胶电泳数据采用Tanon Gis软件分析。
独家科研数据包,助您复现前沿成果,加速创新突破
获取完整内容-
Transmission electron microscopy
JEM-1011
JEOL, Ltd.
Imaging of particle morphologies
暂无现货
预约到货通知
-
Confocal laser scanning microscope
LSM 710
Zeiss
Cell imaging
ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex
立即获取同款设备
-
Zetasizer nanoseries
Nano zs90
Malvern Instruments Ltd.
Measurement of polyplexes sizes and surface charges
暂无现货
预约到货通知
-
LED lamp
pE-4000
CoolLED Ltd.
Light irradiation
暂无现货
预约到货通知
-
登录查看剩余2件设备及参数对照表
查看全部