研究目的
为展示在MALDI-MSI中用于样本制备和数据采集质量检查的内外部质控方法,该方法尤其适用于单次MALDI-MSI实验中获取大量光谱数据或合并处理多个独立实验数据的情况。
研究成果
研究表明,福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)蛋清可作为MALDI-MSI的可靠外部对照,提供稳定的m/z信号用于质量监控。采用均质化蛋清及标准化技术可提升信号一致性,有助于MALDI-MSI临床工作流程的标准化。
研究不足
该研究承认由于光谱数量较少、点与点之间的差异性以及使用了不同的蛋清部分,导致信号强度存在差异。建议使用均质化的蛋清以提高信号一致性。
1:实验设计与方法选择
本研究评估了使用蛋清作为肽段和N-糖基化MALDI-MSI的外部对照,以监测整个实验过程中的检测器性能和样本制备情况。通过采用对照组织,评估了信号稳定性和酶原位消化效率。
2:样本选择与数据来源
使用了FFPE组织样本和蛋清。由于蛋清具有均一性、易获取性、成本效益高且制备简单,因此被选为质量控制样本。
3:实验设备与材料清单
MALDI-TOF/TOF质谱仪(布鲁克道尔顿)、ImagePrep工作站(布鲁克道尔顿)、iMatrixSpray、徕卡RM2255全自动旋转式切片机、爱普生扫描仪(型号J252A)、佳能CanoScan 5600 F扫描仪。
4:实验流程与操作步骤
工作流程包括组织切片、抗原修复、原位胰蛋白酶消化和基质沉积、MALDI-TOF/TOF MS数据采集以及数据处理和光谱评估。
5:数据分析方法
使用flexImaging和SCiLS Lab进行数据可视化。使用ClinProTools和SCiLS Lab对峰进行统计评估。比较了有TIC归一化和无TIC归一化的信号强度。
独家科研数据包,助您复现前沿成果,加速创新突破
获取完整内容-
MALDI-TOF/TOF mass spectrometer
ultrafleXtreme
Bruker Daltonics
Data acquisition for MALDI-MSI
-
Leica RM2255 Fully Automated Rotary microtome
RM2255
Leica
Tissue sectioning
-
CanoScan 5600 F
5600 F
Canon
Scanning of slides for MALDI-TOF/TOF MS instrument teaching purposes
-
ImagePrep station
Bruker Daltonics
Sample preparation for MALDI-MSI
-
iMatrixSpray
Sample preparation device for mass spectrometric imaging
-
Epson Scanner
J252A
Epson
Scanning of slides
-
登录查看剩余4件设备及参数对照表
查看全部