研究目的
开发一种近红外激光诱导表面变形(NIR-LISD)显微镜,用于活体植物细胞表面的动态粘弹性测量,旨在相比可见光激光束照射减少对细胞的损伤。
研究成果
近红外激光诱导散射差分显微镜能有效测量植物细胞表面的动态粘弹性且损伤更小。它能区分单个根毛的不同区域,显示亚顶端区域比侧区更具弹性。该工具适用于研究易受紫外线或可见光损伤的细胞。
研究不足
该研究聚焦于植物细胞,在未经进一步研究的情况下可能不直接适用于动物细胞。所施加外力的上限频率有限,且该方法需要精确校准激光束。
1:实验设计与方法选择:
开发近红外激光诱导表面变形(NIR-LISD)显微镜,通过近红外激光束诱导表面形变,并测量反射探测光束强度变化来评估粘弹性。
2:样本选择与数据来源:
培养野生型地钱(Marchantia polymorpha)孢芽以生长假根并进行测量。
3:实验设备与材料清单:
钛宝石激光器、Nd:YVO4激光器、声光调制器(AOM)、氦氖激光器、物镜、XY载物台、光电二极管、快速傅里叶变换(FFT)频谱分析仪。
4:实验步骤与操作流程:
将泵浦光束和探测光束聚焦于样品表面,通过分析反射探测光束强度确定粘弹性特性。
5:数据分析方法:
利用FFT频谱分析仪处理信号与局部光束以获取功率谱。
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Photodiode
Model C10508
HAMAMATSU
Detects the reflected probe beam.
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Ti:Sapphire laser
MBR-110
Coherent
Used as the pump beam to induce surface deformation.
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Nd:YVO4 laser
Verdi-V18
Coherent
Pumps the Ti:Sapphire laser.
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Objective
LCPlan-N-IR
OLYMPUS
Focuses the pump and probe beams onto the sample surfaces.
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Objective
LUCPlanFL-N
OLYMPUS
Focuses the pump and probe beams onto the sample surfaces.
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AOM
Model 3080-125
Crystal Technology Inc.
Modulates the frequency of intensity of the pump beam.
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He–Ne laser
25LHP213
MELLES GRIOT
Used as the probe beam.
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XY stage
BIOS-205T
SIGMA KOKI
Positions the sample in the horizontal direction.
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FFT spectrum analyzer
Model 3056
Sony Tektronix
Processes the signal and local beams to obtain power spectra.
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