研究目的
研究荧光标记小分子亲和配体在血管内皮信号传导和血管生成中用于Tie2成像的应用。
研究成果
Reb-TMR衍生物在体内外均能有效标记Tie2，为研究Tie2在疾病中的作用提供了有前景的工具。进一步优化及开发配套成像剂可提升其在临床应用中的效用。
研究不足
Reb-SiR类似物显示出微弱的染色效果和高背景荧光，表明其可能存在对细胞环境敏感性或结合动力学方面的问题。该研究主要聚焦于Reb-TMR，而Reb-650的优化工作将留待未来进行。
1：实验设计与方法选择：
基于晶体结构合成三种瑞巴替尼荧光衍生物，在体内外实验中进行评估。
2：样本选择与数据来源：
体外实验使用HUVEC和HEK293T细胞；活体成像采用Tie2-GFP小鼠。
3：实验设备与材料清单：
Operetta高内涵筛选系统、IXM MetaExpress、奥林巴斯BX63显微镜、Fugene 6转染试剂盒、康宁3764 384孔板。
4：实验流程与操作步骤：
细胞荧光衍生物处理、竞争性结合实验、Tie2质粒转染、小鼠活体成像。
5：数据分析方法：
使用Columbus服务器和ImageJ FIJI进行图像分析，荧光偏振结合实验。
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获取完整内容-
Operetta High Content Screening System
High content imaging for in vitro assays
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IXM MetaExpress
High content imaging for in vitro assays
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Olympus BX63 microscope
Olympus
High resolution imaging for co-localization assays
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Fugene 6 transfection kit
E2691
Promega
Transfection of Tie2 plasmid into cells
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Corning 3764 384-well plates
Corning
Cell culture and treatment for microscopy assays
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