研究目的
阐明PBM背后的原理及其改善的主要机制。
研究成果
研究表明,不同波长的光对人体成纤维细胞增殖和基因表达具有不同影响。蓝光抑制增殖,红光促进增殖,而紫外线影响甚微。RNA测序分析揭示了这些效应涉及的关键基因和通路,为未来光生物调节机制研究奠定了基础。
研究不足
该研究聚焦于三种特定波长的光及其对人类成纤维细胞的影响。所观察到的效应背后的机制尚需进一步阐明。该研究未探究不同波长组合的效果,也未研究光生物调节疗法的长期效应。
1:实验设计与方法选择:
使用发射390纳米紫外光、415纳米蓝光和660纳米红光的三种LED芯片制作光照设备,通过这些波长对人类成纤维细胞进行光生物调节(PBM)测试。采用CCK-8法检测细胞增殖情况,并进行RNA测序分析以观察差异表达基因。
2:样本选择与数据来源:
人类成纤维细胞取自一名28岁男性包皮组织。
3:实验设备与材料清单:
390纳米、415纳米和660纳米LED设备;细胞计数试剂盒(CCK-8);用于RNA提取的Trizol试剂;Illumina HiSeq 2000测序平台。
4:实验流程与操作步骤:
培养细胞,用LED光照射,随后分析细胞增殖和基因表达情况。提取RNA,构建文库并进行测序。
5:数据分析方法:
生物信息学分析重点包括热图分析和蛋白质互作(PPI)网络,差异表达基因(DEGs)通过STRING数据库进行分析。
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获取完整内容-
LED
390 nm, 415 nm, 660 nm
CREE
Used for irradiating human fibroblasts to study the photobiomodulation effect.
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Power Meter
PM100D
Thorlabs
Used to measure the power density of the LED irradiation.
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Sensor
S170C
Thorlabs
Used in conjunction with the power meter to measure power density.
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Spectrophotometer
Multiscan GO
Thermo Scientific
Used to measure the optical density at 450 nm for the CCK-8 test.
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Cell Counting Kit
CCK-8
Dojindo
Used to measure cell proliferation.
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Thermocouple
PT100
Used to measure the temperature of the irradiation plane.
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Trizol Reagent
Invitrogen
Used for RNA extraction from human fibroblast cells.
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Sequencing Platform
Illumina HiSeq 2000
Illumina
Used for sequencing the cDNA libraries constructed from the RNA samples.
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