研究目的
开发一种新型紫外-光子计数探测器(UV-POPS),用于超灵敏检测水中未标记的牛血清白蛋白,改进以往在灵敏度和背景光抑制方面的局限性。
研究成果
新型UV-POPS检测器实现了超高灵敏度,在1.0飞升体积中可检测到30个分子,若考虑溶剂对灵敏度的影响,其性能与热透镜显微镜(TLM)相当。该检测器适用于纳米通道和单微米通道,并能检测多种紫外吸收分子,使其成为未来单细胞蛋白质组学研究的有力工具。
研究不足
POPS检测器的灵敏度受通道深度和向通道壁的热传递影响,较小通道因热损失而表现出灵敏度降低。激发光束的调制频率也会影响热传递和灵敏度。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用紫外激发光热光学相移(POPS)检测系统实现超灵敏检测。新设计包含中继光学元件以降低背景光干扰,并使用现成的微分干涉棱镜提升性能。
2:样本选择与数据来源:
选用牛血清白蛋白(BSA)和腺嘌呤水溶液作为样本,用于评估检测器的灵敏度与性能表现。
3:实验设备与材料清单:
关键设备包括二极管泵浦固态激光器(OBIS 532LS-150,相干公司)和氩离子激光器(INNOVA 300C FreD,相干公司),分别用作探测光束与激发光束。微/纳米通道制备于熔融石英基底上。
4:实验流程与操作步骤:
通过微分干涉棱镜分离并干涉探测光束,激发光束单独引入以避免损伤。在不同通道深度和调制频率下评估灵敏度。
5:数据分析方法:
基于信噪比(S/N)和样本溶液校准曲线计算灵敏度与检测限(LOD)。
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