研究目的
开发一个专用平台,用于对同一外泌体在临床生物流体中直接进行同步的生物物理和生物分子评估,以实现多参数外泌体分析。
研究成果
TPEX平台可直接对临床样本中的外泌体生物标志物进行快速、灵敏且无需洗涤的多参数分析。该平台能区分生物标志物的组织状态,并显示外泌体亚群可更准确地鉴别患者预后情况。
研究不足
该技术需要在多种疾病的大规模临床研究中进行进一步验证。技术改进可以提高分析性能,以检测罕见且复杂的分子修饰。
1:实验设计与方法选择:
TPEX平台通过三个功能步骤区分和测量外泌体标志物与非囊泡游离分子:双标记、模板化纳米等离子体开发及信号检测。
2:样本选择与数据来源:
使用源自人结直肠腺癌细胞系(DLD-1)及其他细胞系的外泌体,同时分析癌症患者的临床腹水样本。
3:实验设备与材料清单:
透射电子显微镜(TEM)、动态光散射分析、微流控装置、基于智能手机的光学检测器、金纳米颗粒(AuNP)、荧光适配体及抗体。
4:实验流程与操作步骤:
外泌体用荧光分子探针和AuNP标记,随后原位生长金形成纳米壳层,测量所得光学信号(吸光度与荧光)。
5:数据分析方法:
定义并分析TPEX吸光度与荧光测量值以评估外泌体生物标志物。
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