研究目的
比较成骨细胞培养中形成的骨矿物质质量与出生后小鼠颅骨骨的质量，并评估提取细胞活性和骨基质质量信息的可行性。
研究成果
成骨细胞培养中形成的骨组织表现出基质逐渐成熟和矿化，但未能完全复现天然骨中高度有序的胶原纤维排列。本研究所采用的骨质量拉曼光谱检测方法，同样适用于评估组织工程研究中预临床模型获取的离体标本。
研究不足
第8天观察到的高初始矿物/基质比值需要进一步研究。该研究若能增加重复实验，将有助于确定第8天的高初始矿物/基质比值是异常值，还是与分离自胎鼠颅骨组织的Sca-1干细胞/祖细胞固有的正常生物学变异有关。
1：实验设计与方法选择：
从胎鼠颅骨分离的干细胞/祖细胞在成骨分化条件下培养于熔融石英载玻片上28天。采用拉曼显微镜和矿化染色技术按特定时间间隔分析载玻片。
2：样本选择与数据来源：
从胎鼠颅骨分离的干细胞/祖细胞及出生后小鼠的颅骨组织。
3：实验设备与材料清单：
熔融石英载玻片（S1-UV级，12.7毫米圆形，Esco Products公司）、配备785纳米激光器的拉曼显微镜、50×0.80数值孔径（NA）物镜（尼康仪器公司）、MATLAB?软件（The MathWorks公司）、GRAMS/AI?软件（ThermoGalactic公司）、SPSS统计软件（IBM SPSS Statistics 24版，IBM公司）。
4：7毫米圆形，Esco Products公司）、配备785纳米激光器的拉曼显微镜、50×80数值孔径（NA）物镜（尼康仪器公司）、MATLAB?软件（The MathWorks公司）、GRAMS/AI?软件（ThermoGalactic公司）、SPSS统计软件（IBM SPSS Statistics 24版，IBM公司）。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：细胞在成骨分化条件下培养，按特定时间间隔取出载玻片，用冰浴70%乙醇固定，通过拉曼显微镜和矿化染色技术分析。
5：数据分析方法：
光谱数据经MATLAB?和GRAMS/AI?软件处理，统计学分析使用SPSS统计软件完成。
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
fused‐quartz slides
S1‐UV grade, 12.7‐mm circulars
Esco Products
Used for culturing stem/progenitor cells under osteogenic differentiation conditions due to their low Raman background compared with glass and their ability to maintain cell proliferation and morphology.
-
Raman microscope
equipped with a 785 nm laser
Used for analyzing the slides at specific time intervals to assess the quality of bone mineral formed in osteogenic cell cultures.
-
50 × 0.80 numerical aperture (NA) objective
Nikon Instruments, Inc.
Used to focus the excitation laser to give ~23 mW laser power at the sample.
-
MATLAB? software
The MathWorks Inc.
Used for processing all sample and calibration spectra using locally written scripts.
-
GRAMS/AI? software
ThermoGalactic Inc.
Used for further processing of sample spectra, including background subtraction and smoothing.
-
SPSS Statistics Software for Windows
IBM SPSS Statistics Version 24
IBM Corp.
Used for statistical analyses of the data.
-
登录查看剩余4件设备及参数对照表
查看全部
