研究目的
研究异常朊蛋白（PrPSc）的结构特征及金莲异黄酮敏化光反应诱导的分子间交联机制。
研究成果
原黄素敏化光反应增强了PrPSc/res分子间的交联作用，尤其发生在N端区域，为评估PrPSc/res的结构特征和相互作用提供了一种有效方法。
研究不足
该研究未阐明PrPSc/res分子中交联位点的化学结构。光反应对朊病毒传染性的影响尚未确定。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用免疫印迹分析检测经金莲异黄酮处理和紫外线照射的朊病毒材料中SDS抗性PrPSc/res寡聚体的形成。
2：样本选择与数据来源：
使用朊病毒感染细胞裂解物和小鼠脑匀浆作为样本。
3：实验设备与材料清单：
金莲异黄酮、紫外线灯（365 nm；1.2 mW/cm2）、蛋白酶K、磷钨酸、十二烷基肌氨酸钠、碘克沙醇及多种抗PrP抗体。
4：2 mW/cm2）、蛋白酶K、磷钨酸、十二烷基肌氨酸钠、碘克沙醇及多种抗PrP抗体。 实验步骤与操作流程：
4. 实验步骤与操作流程：样本经金莲异黄酮和紫外线照射处理后，进行蛋白酶K消化及免疫印迹分析。
5：数据分析方法：
使用Image J软件对免疫印迹信号进行密度测定分析。
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primuline
MP Biomedicals
Fluorescent dye with photosensitization activity used to enhance SDS-resistant PrPSc/res oligomer formation.
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UV lamp
365 nm; 1.2 mW/cm2
Used for UV irradiation to induce photoreaction in samples.
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proteinase K
Used for PK digestion to obtain PrPres samples.
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phosphotungstic acid
Used in the purification process of PrPSc from homogenates.
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sarkosyl
Used in the purification process of PrPSc from homogenates.
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iodixanol
Used in the purification process of PrPSc from homogenates.
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anti-PrP antibodies
SAF83, 1E4, 3C10, 6D11, 6H4, SAF70, M20
SPI-BIO, Abcam, Jena Bioscience, BioLegend, Prionics, Cayman Chemical, Santa Cruz Biotechnology
Used for immunoblotting to detect PrP signals.
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