研究目的
研究利用金纳米花(AuNFs)作为探针,通过局部表面等离子体共振(LSPR)技术原位监测碱性磷酸酶(ALP)活性。
研究成果
该研究成功证明了金纳米框架(AuNFs)作为局域表面等离子体共振(LSPR)探针,可用于体外及活细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性的超灵敏检测。该方法为细胞研究提供了新途径,并在基于ALP的药物发现方面具有潜在应用价值。
研究不足
该研究的局限性在于金纳米笼(AuNFs)探针仅针对碱性磷酸酶(ALP)活性,且可能受到其他细胞成分的干扰。该技术在复杂生物样本中的灵敏度和分辨率有待进一步优化。
1:实验设计与方法选择:
通过氧化破坏聚多巴胺包覆的金纳米颗粒并随后生长金纳米花瓣来合成金纳米花(AuNFs)。采用表面等离子体共振(LSPR)技术监测碱性磷酸酶(ALP)活性。
2:样本选择与数据来源:
以HepG2和HEK 293细胞作为监测ALP活性的模型细胞系。
3:实验设备与材料清单:
使用金纳米颗粒、聚多巴胺、四氯金酸(HAuCl4)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羟胺、硝酸银(AgNO3)、L-抗坏血酸-2-磷酸酯倍半镁盐水合物(AAP)及ALP。
4:4)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羟胺、硝酸银(AgNO3)、L-抗坏血酸-2-磷酸酯倍半镁盐水合物(AAP)及ALP。 实验步骤与操作流程:
4. 实验步骤与操作流程:合成并表征AuNFs。通过ALP催化的Ag在AuNFs表面的沉积来监测ALP活性,测量LSPR响应及散射颜色变化。
5:数据分析方法:
通过分析LSPR峰位移及散射颜色变化确定ALP活性。
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Gold nanoparticles
Au13
Used as seeds for the synthesis of larger gold nanoparticles (Au50).
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Gold nanoparticles
Au50
Core particles for the synthesis of gold nanoflowers (AuNFs).
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Polydopamine-coated Au50
PDA/Au50
Intermediate product in the synthesis of AuNFs, providing a surface for nanopetal growth.
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Gold nanoflowers
AuNFs
Probes for in-situ monitoring of ALP activity using LSPR technique.
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Silver nitrate
AgNO3
Source of Ag+ for deposition on AuNFs surface, catalyzed by ALP activity.
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L-ascorbic acid 2-phosphate sesquimagnesium salt hydrate
AAP
Substrate for ALP, hydrolyzed to produce L-ascorbic acid (AA) which reduces Ag+ to Ag.
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Alkaline phosphatase
ALP
Enzyme whose activity is monitored via Ag deposition on AuNFs.
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