研究目的
开发一种细胞检测方法，用于动态可视化活细胞中小分子诱导的蛋白质-蛋白质结合与解离过程。
研究成果
开发的SPPIER检测法在活细胞中实现了显著的荧光变化、高亮度以及快速可逆的动力学特性，能够稳健且特异性地检测小分子诱导的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）。该方法还可检测小分子诱导的PPI解离，表明其在筛选高效PPI抑制剂方面具有应用潜力。
研究不足
该研究未讨论引入的寡聚标签对蛋白质功能的潜在干扰，也未涉及基于荧光团相变检测的空间分辨率限制。
1：实验设计与方法选择：
该研究基于荧光团相变原理设计了名为SPPIER的蛋白质相互作用检测方法，利用绿色荧光蛋白（GFP）进行基因编码荧光标记。
2：样本选择与数据来源：
使用HEK293T/17细胞进行质粒载体的瞬时转染。
3：实验设备与材料清单：
质粒载体、HEK293T/17细胞、DMEM培养基、胎牛血清（FBS）、非必需氨基酸、青霉素、链霉素、磷酸钙转染试剂、脂质体转染试剂、玻璃底微孔培养皿、环境控制培养箱、NIS-Elements Ar显微镜成像软件、ImageJ软件。
4：实验流程与操作步骤：
细胞转染质粒DNA后24小时进行成像，通过延时摄影观察并在成像过程中添加化学试剂。
5：数据分析方法：
图像经ImageJ处理，使用"分析颗粒"功能测定荧光强度。
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获取完整内容-
EGFP
Fluorescent tag in live cells for genetically encoded fluorescence.
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HEK293T/17 cells
Used for transient transfection with plasmid constructs.
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DMEM
Cell culture medium.
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FBS
Supplement for cell culture medium.
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NIS-Elements Ar Microscope Imaging Software
Nikon
Image acquisition control.
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ImageJ
NIH
Image processing and analysis.
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