研究目的
研究在硬化蛋白抗体偶联的二氧化钛纳米管阵列上培养的骨细胞对骨折修复过程中成骨细胞分化的调控作用，特别是在骨质疏松条件下。
研究成果
研究表明，抗硬化蛋白抗体偶联的二氧化钛纳米管阵列（TNTs-scl）能增强对MLO-Y4细胞的细胞相容性，并减少MLO-Y4细胞分泌的硬化蛋白量。硬化蛋白分泌量的降低显著激活Wnt信号通路以促进成骨细胞分化，为钛表面工程化处理提供了一种简单有效的方法，从而改善骨质疏松性骨折的骨修复效果。
研究不足
该研究聚焦于成骨细胞与骨细胞在改性钛表面的体外共培养。硬化蛋白抗体偶联的二氧化钛纳米管阵列在体内的有效性和长期生物相容性尚需进一步研究。
1：实验设计与方法选择：
研究通过在钛基底上制备TiO2纳米管阵列以模拟天然骨的纳米级结构，随后通过多巴胺将硬化蛋白抗体偶联至其表面。采用场发射扫描电子显微镜（SEM）、接触角测量和共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）对TiO2纳米管阵列表面的硬化蛋白抗体偶联情况进行表征。
2：样本选择与数据来源：
使用小鼠成骨样细胞系（MLO-Y4）及从昆明小鼠颅骨分离的原代成骨细胞。
3：实验设备与材料清单：
钛箔、3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）、碱性磷酸酶（ALP）和双辛可宁酸（BCA）检测试剂盒、盐酸多巴胺、硬化蛋白抗体等。
4：实验流程与操作步骤：
研究包括TiO2纳米管阵列的制备、硬化蛋白抗体的偶联、细胞培养、细胞活力与形态评估、培养基中硬化蛋白水平检测以及MLO-Y4细胞中硬化蛋白基因表达。
5：数据分析方法：
使用OriginPro（9.0版）通过Student's t检验和单因素方差分析（ANOVA）进行统计分析，置信水平为95%和99%。
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Field emission scanning electron microscope
JEOL JSM-7800F
JEOL
Used to observe the morphology of different samples.
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Confocal laser scanning microscope
TCS SP5
Leica
Used to observe the conjugation of sclerostin antibody onto the surface of TiO2 nanotube arrays.
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Titanium foils
0.25mm thickness, 99.5%
Alfa Aesar Co.
Used as the substrate for the fabrication of TiO2 nanotube arrays.
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Microplate reader
Bio-Rad 680
Bio-Rad
Used to measure the light absorbance of the solution.
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