研究目的
开发一种新型电化学发光（ECL）方法，用于检测和测定caspase-3活性，该方法以金纳米颗粒修饰的还原氧化石墨烯片作为信号放大元件，以辣根过氧化物酶（HRP）作为增强ECL强度的试剂。
研究成果
这种基于肽的生物传感器可作为早期检测细胞凋亡、细胞更新及癌症相关疾病的优秀候选方案，其线性动态范围为0.5-100飞摩尔，定量下限为0.5飞摩尔。
研究不足
该研究未明确提及局限性，但潜在的优化方向可能包括进一步提高生物传感器的灵敏度和选择性、降低生物传感器制备过程的复杂性，以及扩大可检测的caspase-3活性范围。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用新型电化学发光（ECL）法检测caspase-3活性，使用还原氧化石墨烯（RGO）修饰金纳米颗粒（AuNPs）和辣根过氧化物酶（HRP）。
2：样本选择与数据来源：
以A549上皮细胞系作为真实样本进行验证。
3：实验设备与材料清单：
设备包括Autolab PGSTAT302N、滨松光电倍增管、场发射扫描电镜（FE-SEM）、西门子D5000 X射线衍射仪、岛津傅里叶变换红外光谱仪；材料包括氧化石墨烯（GO）、3-巯基丙基三甲氧基硅烷（MPTMS）、硼氢化钠、柠檬酸钠、氯金酸、过氧化氢、6-巯基-1-己醇（MCH）、鲁米诺、生物素标记肽段、生物素标记HRP、链霉亲和素包被磁珠。
4：2N、滨松光电倍增管、场发射扫描电镜（FE-SEM）、西门子D5000 X射线衍射仪、岛津傅里叶变换红外光谱仪；材料包括氧化石墨烯（GO）、3-巯基丙基三甲氧基硅烷（MPTMS）、硼氢化钠、柠檬酸钠、氯金酸、过氧化氢、6-巯基-1-己醇（MCH）、鲁米诺、生物素标记肽段、生物素标记HRP、链霉亲和素包被磁珠。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：氧化石墨烯功能化、细胞培养、凋亡诱导、生物传感器制备（含电极清洗与修饰步骤）、ECL特性表征、操作参数优化及真实样本分析。
5：数据分析方法：
通过循环伏安法（CV）和电化学阻抗谱（EIS）分析电化学测量结果；测定并分析ECL强度以确定caspase-3活性。
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Autolab PGSTAT302N
PGSTAT302N
Metrohm Autolab
Electrochemical measurements
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Hamamatsu photomultiplier
R12829
Hamamatsu
ECL experiments
