研究目的
开发一种基于FRET的双通道荧光探针,通过活细胞多色成像检测内源性和外源性H2O2与H2S的生成,具有癌症诊断应用潜力。
研究成果
基于FRET的探针PHS1通过多色成像成功检测癌细胞和斑马鱼中的H2O2、H2S及其组合,展现出高选择性、稳定性和无毒性。该探针为双分析物传感提供了新策略,在癌症诊断和治疗开发方面具有应用潜力。
研究不足
该探针对H2S的反应性具有pH依赖性,仅在pH 6–8.5范围内呈现强荧光。研究仅限于体外和斑马鱼模型,未探索其在高等生物体内的进一步应用。复杂生物环境中潜在的干扰因素可能未得到充分解决。
1:实验设计与方法选择:
本研究设计并合成了基于FRET的探针(PHS1),利用香豆素和萘酰亚胺荧光团检测H2O2和H2S。方法包括紫外-可见光谱、荧光光谱、细胞毒性实验以及细胞和斑马鱼中的共聚焦荧光成像。
2:样本选择与数据来源:
使用HT-29和HeLa癌细胞系,来源于台湾食品工业发展研究所。斑马鱼作为活体样本,在标准条件下饲养。
3:实验设备与材料清单:
仪器包括岛津UV-1800分光光度计、布鲁克400 MHz核磁共振仪、IonSpec HiResESI质谱仪、RF-6000荧光分光光度计、徕卡TCS SP5 X AOBS共聚焦荧光显微镜和Mullikan GO酶标仪?;饭鹤远嗉疑桃倒┯ι蹋ㄈ鏏vra、Alfa Aesar、Sigma Aldrich)。
4:实验流程与操作步骤:
合成PHS1及中间体,通过H2O2和H2S滴定进行紫外-可见和荧光测量,采用MTT法进行细胞毒性实验,培养细胞并成像以检测内源性和外源性分析物,以及对探针孵育和分析物处理的斑马鱼进行成像。
5:数据分析方法:
测量并分析荧光强度变化,利用回归方程计算检测限,使用共聚焦显微镜处理图像。
独家科研数据包,助您复现前沿成果,加速创新突破
获取完整内容-
UV-1800 spectrophotometer
UV-1800
Shimadzu
Recording UV-Vis spectra
暂无现货
预约到货通知
-
NMR spectrometer
400 MHz
Bruker
Taking NMR spectra
暂无现货
预约到货通知
-
FL spectrometer
RF-6000
Shimadzu
Obtaining fluorescence spectra
-
Confocal Fluorescence Microscope
TCS SP5 X AOBS
Leica
Fluorescence imaging of cells and zebrafish
暂无现货
预约到货通知
-
Mass spectrometer
HiResESI
IonSpec
Collecting mass spectra
暂无现货
预约到货通知
-
Microplate reader
Mullikan GO
Not specified
Measuring absorbance in cytotoxicity assays
暂无现货
预约到货通知
-
登录查看剩余4件设备及参数对照表
查看全部