研究目的
开发一种可靠、快速且超灵敏的免疫测定方法,利用Fe3O4超粒子@SiO2纳米复合材料作为红外探针检测免疫球蛋白G(IgG),并通过磁场辅助提高灵敏度和速度。
研究成果
基于Fe3O4超粒子@SiO2纳米复合材料的免疫分析法为IgG检测提供了一种灵敏、快速且可靠的方法,磁场辅助使其性能得到增强。该方法显示出高选择性、特异性和稳定性,适用于真实血样检测,具有实际应用价值。未来工作应将该方法拓展至其他分析物检测。
研究不足
该方法对其他物质(如DNA、细菌和污染物)的适用性仍有待进一步探索。
1:实验设计与方法选择:
采用Fe3O4超粒子@SiO2纳米复合材料作为红外探针,设计夹心免疫分析策略。该方法利用SiO2的红外指纹信号进行检测,通过磁场辅助增强灵敏度并缩短检测时间。
2:样本选择与数据来源:
以人IgG为分析物,采集匿名志愿者血液样本处理获得血浆。选用BSA、GLU、LYS、HIgM和HIgA等作为干扰剂进行选择性测试。
3:实验设备与材料清单:
材料包括Fe3O4纳米颗粒、DTAB、PVP、TEOS、APTES、戊二醛、羊抗人IgG、人IgG、BSA等(购自Sigma Aldrich和北京化学试剂厂)。设备包括透射电镜(JEOL JEM-2100)、X射线衍射仪(Rigaku D/MAX 2500)、SQUID磁强计(Quantum Design MPMS-XL)和傅里叶变换红外光谱仪(Nicolet IS10)。
4:0)、X射线衍射仪(Rigaku D/MAX 2500)、SQUID磁强计(Quantum Design MPMS-XL)和傅里叶变换红外光谱仪(Nicolet IS10)。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:通过疏水溶剂法制备Fe3O4超粒子,采用一锅乳液滴法包覆SiO2,通过戊二醛交联功能化抗体。制备金基底用于抗体固定。免疫分析流程包含分析物与探针孵育、磁分离、有无磁场条件下基底捕获及FTIR测量。
5:数据分析方法:
采用1250 cm?1至900 cm?1区间红外吸收峰积分面积进行定量分析,按3Sb/m准则计算检测限并评估线性相关性。
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Transmission Electron Microscope
JEM-2100
JEOL
Characterization of morphologies of Fe3O4 superparticles and Fe3O4 superparticle@SiO2 nanocomposites
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X-ray Powder Diffractometer
D/MAX 2500
Rigaku
Characterization of structures of Fe3O4 superparticles and Fe3O4 superparticle@SiO2 nanocomposites
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SQUID Magnetometer
MPMS-XL
Quantum Design
Measurement of magnetic properties of Fe3O4 superparticle@SiO2 nanocomposites at 300 K
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FTIR Spectrometer
IS10
Nicolet (Thermo Fisher Scientific)
Recording FTIR transmittance and reflection absorption spectra under liquid nitrogen environment
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