研究目的
开发一种具有大斯托克斯位移的亮红色发射苯乙烯基探针，用于无洗涤条件下活细胞线粒体可视化，解决现有商业探针（如小斯托克斯位移和背景干扰等）的局限性。
研究成果
探针2是一种高度可靠的亮红色发射型苯乙烯基染料，具有大斯托克斯位移、优异的线粒体选择性及低细胞毒性（LC50 > 20 μM）。它可实现活细胞免洗涤成像，且不受生物分子干扰，在线粒体可视化方面优于现有市售探针。
研究不足
探针2未能对固定细胞中的线粒体进行染色，表明其可能依赖于线粒体膜电位（功能性染料），这限制了其在功能失调线粒体中的应用。该探针在高度非极性和极性溶剂中荧光较弱，可能影响其在不同细胞环境中的性能。本研究聚焦于体外细胞系，未探索体内应用。
1：实验设计与方法选择：
本研究涉及合成新型苯乙烯基染料（探针2）并表征其光学特性，随后应用于活细胞成像以评估线粒体选择性和生物相容性。理论模型采用分子内电荷转移（ICT）解释光物理性质。
2：样本选择与数据来源：
化学合成使用Acros Organics试剂。细胞研究采用COS-7（正常）和A549（癌症）细胞系，分别培养于DMEM和RPMI培养基中，试剂来自Sigma-Aldrich和Fisher Scientific。
3：实验设备与材料清单：
仪器包括Hewlett Packard-8453二极管阵列分光光度计（UV-vis研究）、HORIBA Fluoromax-4荧光光谱仪（荧光研究）、配备63倍油镜的Zeiss LSM 710共聚焦显微镜（成像）、Spectramax 5e微孔板读数器（活力检测）。材料包含商用染料（MitoTracker Green FM、LysoTracker Green DND-26）、CellTiter-Glo发光细胞活力检测试剂盒及多种合成用化学品。
4：6）、CellTiter-Glo发光细胞活力检测试剂盒及多种合成用化学品。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：通过二醛与4-甲基吡啶盐在乙醇中反应合成探针2，沉淀法纯化。在DCM、DMSO、乙醇、水等溶剂中进行光学表征。细胞染色使用500 nM探针2（37°C，30分钟），无需洗涤直接成像。与MitoTracker Green和LysoTracker Green进行共定位研究。采用CellTiter-Glo试剂盒检测细胞活力。
5：数据分析方法：
以罗丹明6G为标准计算荧光量子产率。使用Zeiss LSM软件和ImageJ分析共定位（曼德尔重叠系数）。通过Origin8软件的剂量-反应公式计算细胞活力LC50值。
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
HORIBA Fluoromax-4 spectrofluorometer
Fluoromax-4
HORIBA
Used for fluorescence emission studies of the probe.
暂无现货
预约到货通知
-
Zeiss LSM 710 confocal microscope
LSM 710
Zeiss
Used for fluorescence confocal microscopy imaging of live cells stained with the probe.
ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex
立即获取同款设备
-
MitoTracker Green FM
Green FM
MitoTracker
Commercial mitochondria stain used for co-localization studies with the synthesized probe.
暂无现货
预约到货通知
-
LysoTracker Green DND-26
Green DND-26
LysoTracker
Commercial lysosome stain used to confirm specificity of the probe to mitochondria.
暂无现货
预约到货通知
-
Hewlett Packard-8453 diode array spectrophotometer
8453
Hewlett Packard
Used for UV-vis absorption studies of the synthesized probe.
暂无现货
预约到货通知
-
Spectramax 5e microplate reader
5e
Spectramax
Used for luminescence readings in cell viability assays.
暂无现货
预约到货通知
-
CellTiter-Glo Luminescent cell viability assay kit
CellTiter-Glo
Promega
Used to assess cell viability and calculate LC50 values for the probe.
暂无现货
预约到货通知
-
登录查看剩余5件设备及参数对照表
查看全部
