研究目的
建立一个更符合白内障术后临床情况的人眼晶状体囊袋体外培养体系,并利用该优化模型评估人工晶状体对后发性白内障形成的潜在影响。
研究成果
分级培养的人晶状体囊袋模型能有效模拟临床后发性白内障特征,适用于人工晶状体评估。与爱尔康Acrysof相比,豪雅Vivinex人工晶状体在抑制后发性白内障进展及晶状体表面细胞生长方面表现更优,显示出更好的临床预后潜力。
研究不足
该模型未观察到与再生性后发性白内障相关的Elschnig珍珠和Soemmering环形成。其受限于组织可用性,且变化速率可能快于患者实际情况。培养条件采用高初始血清和TGFβ水平,这可能代表极端反应状态。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用分级培养系统的人类晶状体囊袋模型,以模拟白内障手术后的临床变化。方法包括连续环形撕囊、晶状体摘除,以及在28天内使用不同血清和TGFβ2水平进行培养。
2:样本选择与数据来源:
使用经伦理批准获取的人类供体眼,样本来自42-84岁的供体。
3:实验设备与材料清单:
设备包括相差显微镜和改良暗场显微镜、硅胶环、组织培养皿及免疫细胞化学试剂。材料包括人血清、TGFβ2、EMEM培养基、甲醛、Triton-X100、抗体及人工晶状体(Alcon Acrysof和Hoya Vivinex)。
4:EMEM培养基、甲醛、Triton-X抗体及人工晶状体(Alcon Acrysof和Hoya Vivinex)。 实验步骤与操作流程:
4. 实验步骤与操作流程:制备囊袋并固定于硅胶环,在分级或无血清条件下培养。部分囊袋植入人工晶状体。监测手段包括显微镜观察、细胞覆盖率和光散射的图像分析,以及α-SMA和纤连蛋白的免疫细胞化学检测。
5:数据分析方法:
使用ImageJ和Image Pro Premier软件进行图像分析,统计分析采用Student t检验进行比较。
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获取完整内容-
Intraocular Lens
Vivinex
Hoya
Implanted in capsular bags to assess impact on PCO formation, restoring refractive power and acting as a barrier to cell growth.
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Epi fluorescence Microscope
Axiovision
Carl Zeiss AG
Viewed stained preparations for immunocytochemistry.
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Intraocular Lens
Acrysof
Alcon
Implanted in capsular bags to assess impact on PCO formation, restoring refractive power and acting as a barrier to cell growth.
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Microscope
Phase-contrast and modified-dark-field
Used to monitor cell growth and light scatter in capsular bag preparations.
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Image Analysis Software
ImageJ
National Institutes of Health
Quantified cell coverage from micrographs.
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Image Analysis Software
Image Pro Premier
Media Cybernetics
Used to quantify light scatter in the central posterior capsule.
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CCD Camera
UVP
Imaged stained IOLs for cell coverage analysis.
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