研究目的
研究预血管化口腔黏膜细胞片在治疗皮肤烧伤创面中的适用性。
研究成果
预血管化的口腔黏膜细胞片通过加速创面闭合、减少瘢痕形成、促进微血管生成和细胞增殖、减轻炎症与纤维化，并调控基因表达向再生途径发展，从而促进皮肤烧伤创面愈合。
研究不足
该研究未将无预血管化的细胞片或预血管化皮肤细胞片作为对照，这限制了对预血管化效果的直接比较。未评估其临床安全性和人体适用性，需开展更多对照和活体显微镜研究的进一步试验。
1：实验设计与方法选择：
本研究通过角质形成细胞、成纤维细胞和内皮祖细胞体外构建预血管化口腔黏膜细胞片，并在大鼠烧伤创面模型上进行体内实验，与对照组比较愈合效果。
2：样本选择与数据来源：
从Sprague Dawley大鼠获取口腔黏膜样本和外周血，移植后不同时间点采集创面组织进行分析。
3：实验设备与材料清单：
培养皿、Transwell小室、制作烧伤的不锈钢棒、硅橡胶片、缝合线、显微镜（如Leica、Olympus）、ImageJ软件、RT-qPCR仪器（如Applied Biosystems 7500 Fast实时PCR系统）、各类化学试剂和抗体（如Sigma-Aldrich、Thermo Fisher、Novus International产品）。
4：实验流程与操作步骤：
细胞分离扩增、细胞片制备、大鼠三度烧伤创面构建、细胞片或对照移植、创面愈合监测、组织采集、组织学染色、免疫荧光、RT-qPCR基因表达分析及统计学评估。
5：数据分析方法：
使用ImageJ测量创面和瘢痕面积、微血管计数、中性粒细胞及增殖细胞计数、胶原密度测定，采用SYBR Green的RT-qPCR进行mRNA表达分析，使用SPSS软件进行Mann-Whitney U检验和Wilcoxon符号秩检验的统计分析。
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获取完整内容-
Transwell cell culture insert
0.4-mm pore-size polyester membrane
Corning Inc.
Used for solidifying the fibrin mixture and culturing cell sheets.
-
Real-Time PCR System
7500 Fast
Applied Biosystems
Used for quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR) to evaluate gene expression.
-
Phase-contrast microscope
Leica Biosystems
Used for observing and recording colony formation and tube formation of cells.
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Inverted microscope
Leica Biosystems
Used for observing tube formation of endothelial cells.
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Wide-field fluorescence microscope
Olympus
Used for examining immunofluorescence-stained sections.
-
Silastic sheet
0.010" thickness
Bentec Medical
Used as a control covering for burn wounds and to overlay grafts.
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Stainless steel rod
Round-bottom
Used to create third-degree burn wounds on rats by applying heat.
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ImageJ software
National Institutes of Health (NIH)
Used for measuring wound and scar sizes, microvessel counts, and collagen density.
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SPSS software
version 24.0
IBM
Used for statistical analysis of the data.
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