1：实验设计与方法选择：

本研究采用基于表面增强拉曼散射（SERS）的方法，使用以十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）为稳定剂合成的带正电荷银纳米颗粒（AgNPs+）。该方法通过AgNPs+在细菌表面的静电自组装来增强拉曼信号，从而实现病原体的识别与区分。

2：样本选择与数据来源：

使用六种标准菌株（金黄色葡萄球菌29213、金黄色葡萄球菌25923、白色念珠菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌）及临床分离株（52株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌MSSA和215株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA）。菌株购自中国北京国家食品药品监督管理局药品生物制品检定所，并由西南医院临床微生物实验室提供。

3：金黄色葡萄球菌白色念珠菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌）及临床分离株（52株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌MSSA和215株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA）。菌株购自中国北京国家食品药品监督管理局药品生物制品检定所，并由西南医院临床微生物实验室提供。 实验设备与材料清单：

3. 实验设备与材料清单：设备包括扫描电子显微镜（Crossbeam 340，蔡司公司）、Zetasizer分析仪（Zetasizer Nano ZSP，马尔文公司）、分光光度计（NanoDrop 2000，赛默飞世尔科技公司）、拉曼显微光谱仪（XploRA PLUS，堀场科学仪器公司）、细菌计数器（THOMA AUVON）以及自动微生物鉴定系统（Vitek?2 Compact系统，生物梅里埃公司）。材料包括硝酸银（AgNO3）、硼氢化钠（NaBH4）、CTAB等化学品（购自生工生物工程公司）及超纯水（来自Milli-Q系统）。

4：3）、硼氢化钠（NaBH4）、CTAB等化学品（购自生工生物工程公司）及超纯水（来自Milli-Q系统）。 实验流程与操作步骤：

4. 实验流程与操作步骤：合成并表征AgNPs+。培养细菌样本至OD600=1.0，按1:1体积比与AgNPs+混合，孵育30分钟，移液至硅芯片上干燥后，使用532 nm激光（特定参数如10秒曝光时间）采集SERS光谱。

5：0，按

5. 数据分析方法：使用LabSpec 6软件对SERS光谱进行平滑处理、基线校正和归一化。采用SIMCA 14.0软件进行统计分析（偏最小二乘判别分析PLS-DA和正交偏最小二乘判别分析OPLS-DA），包括交叉验证以评估模型性能。