研究目的
开发一种基于内滤效应、利用双发射脲酶包封金纳米簇的自参比比率法检测硫酸酯酶活性。
研究成果
该研究成功开发了一种基于U-AuNCs的硫酸酯酶活性比率荧光传感器,展现出高灵敏度、高选择性和在人血清样本中的适用性,凸显了金纳米簇(AuNCs)在生物传感和临床诊断中的应用潜力。
研究不足
该方法在血清之外的复杂生物基质中可能存在局限性,其特异性可能受到高浓度干扰物质的影响。可能需要针对更低检测限或更宽线性范围进行优化。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用一步生物矿化法合成脲酶包封的金纳米簇(U-AuNCs),并利用内滤效应(IFE)进行比率荧光传感。
2:样本选择与数据来源:
脲酶(来自刀豆)、HAuCl4·4H2O及其他化学试剂购自阿拉丁试剂公司和西格玛奥德里奇公司。使用人血清样本进行实际样品分析。
3:实验设备与材料清单:
紫外-可见分光光度计(UV-2450,岛津)、荧光分光光度计(Cary Eclipse,安捷伦)、时间相关单光子计数光谱仪(F900,爱丁堡分析仪器)、积分球(爱丁堡仪器)、透射电镜(JEM-2100,日本电子)、电子能谱仪(ESCALAB 250 XI,赛默飞世尔)、粒度分析仪(Litesizer 500,安东帕)。
4:实验步骤与操作流程:
U-AuNCs的合成通过混合脲酶、HAuCl4和NaOH,在37°C孵育8小时完成。通过向缓冲液中添加样品、孵育并测量荧光光谱,进行PNP的荧光猝灭实验及硫酸酯酶检测。
5:数据分析方法:
采用荧光强度比值(F630/F410)进行定量分析,应用线性回归和检测限计算,并通过特定公式进行IFE校正。
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