1：实验设计与方法选择：

本研究采用头部固定多参数光声显微镜（PAM）对清醒小鼠的血流动力学和氧代谢进行高分辨率成像。使用选择性鞘氨醇激酶2抑制剂（SLM6031434）提升血液中S1P水平。实验包含常氧与缺氧条件，并通过短暂性大脑中动脉闭塞（tMCAO）建立卒中模型。

2：样本选择与数据来源：

实验动物为Charles River实验室提供的CD-1小鼠（雄性，9-11周龄）。通过LC/MS检测采集血样中的S1P水平。

3：实验设备与材料清单：

设备包括配备激光器（Edgewave BX40-2-G和BX40-2-GR）的PAM系统、超声换能器、光电二极管（Thorlabs SM1D12D）、光纤（Thorlabs P1-460B-FC-2）、透镜组（Thorlabs AC127-025-A）、头部固定装置、用于运动功能测试的转棒仪、用于闭塞确认的激光多普勒血流仪，以及LC/MS系统（岛津Prominence LC和AB Sciex 4000 QTRAP）。材料包含鞘氨醇激酶2抑制剂（SLM6031434和SLM6081442）、麻醉剂异氟烷、牙科水泥（Parkell Inc. C&B Metabond）、染色剂TTC及其他化学试剂。

4：2）、透镜组（Thorlabs AC127-025-A）、头部固定装置、用于运动功能测试的转棒仪、用于闭塞确认的激光多普勒血流仪，以及LC/MS系统（岛津Prominence LC和AB Sciex 4000 QTRAP）。材料包含鞘氨醇激酶2抑制剂（SLM6031434和SLM6081442）、麻醉剂异氟烷、牙科水泥（Parkell Inc. C&B Metabond）、染色剂TTC及其他化学试剂。 实验流程与操作规范：

4. 实验流程与操作规范：通过颅骨磨薄处理制备PAM成像小鼠模型。经静脉注射抑制剂调控S1P水平。在常氧与缺氧条件下测量血流动力学参数（CHb、sO2、CBF、CMRO2）。采用tMCAO诱导卒中，24小时后评估梗死体积、运动功能及神经功能缺损等结局指标。

5：CBF、CMRO2）。采用tMCAO诱导卒中，24小时后评估梗死体积、运动功能及神经功能缺损等结局指标。 数据分析方法：

5. 数据分析方法：统计分析包括双因素方差分析、配对t检验、单因素方差分析（结合Tukey检验）及独立样本t检验，使用ImageJ软件进行梗死区域量化分析。