研究目的
设计和合成两种新型罗丹明基荧光探针,用于生物和环境体系中Fe3+离子的快速灵敏检测。
研究成果
RBA2和RBA3是针对Fe3+的高效"开启型"荧光探针,具有高灵敏度、选择性和低检测限。多种技术证实它们与Fe3+形成1:1复合物,适用于生物成像和环境监测,其中RBA3因硫原子配位而表现出更强的结合能力。
研究不足
探针RBA2对Hg2+、Al3+、Cr3+和Pb2+等金属离子表现出轻微干扰,探针RBA3则对Hg2+、Al3+、Cr3+和Cu2+存在轻微干扰;目前研究仅限于体外和细胞培养条件,进一步体内应用可能需要优化。
1:实验设计与方法选择:
研究涉及设计和合成基于罗丹明的探针RBA2和RBA3,采用荧光和紫外-可见光谱进行检测,并通过DFT计算进行理论分析。
2:样本选择与数据来源:
探针由罗丹明B合成;使用多种金属离子进行选择性测试;采用Hela细胞和实际水样(饮用水、自来水、珠江水)进行应用测试。
3:实验设备与材料清单:
设备包括AVANCE III HD 400核磁共振波谱仪(布鲁克)、UV-2450紫外-可见分光光度计(岛津)、F-4500荧光分光光度计(日立)、蔡司LSM 710共聚焦显微镜;材料包括罗丹明B、多种盐类(如FeCl3)、溶剂(如DMSO)、硅胶(200-300目,青岛海阳化工有限公司)。
4:3)、溶剂(如DMSO)、硅胶(200-300目,青岛海阳化工有限公司)。 实验步骤与操作流程:
4. 实验步骤与操作流程:通过多步反应合成探针;溶液制备;Fe3+及其他离子的荧光和紫外-可见滴定;pH效应研究;乙二胺可逆性测试;Job图和ESI-MS测定化学计量比;1H NMR滴定;DFT计算;细胞培养与成像;MTT法测定细胞毒性;实际水样测试。
5:数据分析方法:
荧光强度测量;采用Benesi-Hildebrand图计算检测限和结合常数;细胞活力的统计分析;使用Gaussian 09软件,基于B3LYP泛函和6-31+G(d,p)基组进行DFT计算。
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NMR Spectrometer
AVANCE III HD 400
Bruker
Recording 1H NMR and 13C NMR spectra for structural confirmation of synthesized compounds.
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UV-Vis Spectrophotometer
UV-2450
Shimadzu
Recording UV-vis absorption spectra for detection of Fe3+ ions.
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Fluorescence Spectrophotometer
F-4500
Hitachi
Recording fluorescence responses for detection of Fe3+ ions.
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Confocal Microscope
LSM 710
Zeiss
Imaging Hela cells for fluorescence detection of Fe3+ in living cells.
ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex
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Silica Gel
200-300 mesh
Qingdao Haiyang Chemical Co., Ltd.
Used in column chromatography for purification of synthesized compounds.
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