研究目的
开发一种新型光电化学生物传感器,用于同时检测两种微小RNA(miRNA141和miRNA21),以提高临床诊断和生物研究的检测效率与灵敏度。
研究成果
所开发的PEC生物传感器成功实现了对双微小RNA(miRNA141和miRNA21)的高选择性、高稳定性同步灵敏检测。该技术无需额外设备、效率更高,且临床诊断适用性良好,在实际样本中回收率达98.5%至102.9%。未来工作可着眼于拓展更多检测靶标及体内应用。
研究不足
该生物传感器仅限于体外检测,对于复杂生物基质可能需要进一步验证。特定纳米复合材料和电压的使用若未经优化,可能无法普遍适用于所有miRNAs。潜在的优化方向包括扩大检测范围及减少其他生物分子的干扰。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用具有不同光电流特性的纳米复合材料(CdTe-C3N4和CdTe-3DGH)进行光电化学(PEC)生物传感检测。通过调节偏置电压的伏安可寻址原理实现信号区分。
2:样本选择与数据来源:
使用合成微小RNA(miRNA141、miRNA21及选择性测试对照序列)和人血清样本,序列购自生工生物工程(上海)股份有限公司。
3:miRNA21及选择性测试对照序列)和人血清样本,序列购自生工生物工程(上海)股份有限公司。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备包括XPS(VG MultiLab 2000系统)、SEM(日立S4800)、TEM(日本电子2100)、电化学工作站(CHI 760e)、氙灯(PLS-SXM300/300UV)及标准三电极池。材料包含EDC、NHS、HAuCl4、CdCl2、NaBH4、碲粉、氧化石墨烯、三聚氰胺及DNA/miRNA序列等化学试剂。
4:0)、TEM(日本电子2100)、电化学工作站(CHI 760e)、氙灯(PLS-SXM300/300UV)及标准三电极池。材料包含EDC、NHS、HAuClCdClNaBH碲粉、氧化石墨烯、三聚氰胺及DNA/miRNA序列等化学试剂。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:通过水热法合成纳米复合材料,修饰ITO电极并固定探针DNA,与目标miRNA及cDNA-Au NPs杂交,在特定电压(-0.109 V和0.27 V)下进行PEC检测以量化光电流变化。
5:109 V和27 V)下进行PEC检测以量化光电流变化。 数据分析方法:
5. 数据分析方法:采用电流-时间法测量光电流响应,运用RSD等统计方法分析线性校准、选择性、稳定性及实际样本回收率。
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Scanning Electron Microscopy
Hitachi S4800
Hitachi
Obtaining SEM images for material characterization
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Transmission Electron Microscopy
JEOL 2100
JEOL
Conducting TEM imaging for nanostructure analysis
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X-ray photoelectron spectroscopy
VG MultiLab 2000
VG
Conducting XPS analysis to characterize nanocomposites
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Electrochemical workstation
CHI 760e
Shanghai Chenhua Instrument Co. Ltd.
Performing PEC measurements and electrochemical analysis
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Xe lamp
PLS-SXM300/300UV
Beijing Perfect light
Serving as a visible light source for PEC experiments
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ITO electrode
Used as the working electrode in the three-electrode cell system
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Saturated calomel electrode
SCE
Serving as the reference electrode
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Platinum wire
Used as the counter electrode
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