研究目的
制备一种新型生物相容且导电的聚己内酯/聚吡咯/多壁碳纳米管（PCL/PPY/MWCNT）纳米纤维支架并评估其性能，同时探究该支架联合电刺激对小梁网间充质干细胞（TM-MSCs）光感受器分化的影响。
研究成果
PCL/PPY/MWCNTs支架结合电刺激有效促进了TM-MSCs的光感受器分化，这通过视紫红质和周边蛋白基因及蛋白表达的增加得到证实。该方法在视网膜组织工程和再生医学中显示出前景，提示需进一步研究以优化并验证其体内应用。
研究不足
该研究未涉及支架的长期稳定性或体内性能。PCL/PPY/MWCNTs支架上的细胞存活率低于组织培养塑料，表明可能存在生物相容性问题?？赡苄枰呕绱碳げ问椭Ъ茏槌梢蕴岣吡菩?。
1：实验设计与方法选择：
研究通过特定条件（高压24千伏、流速0.4毫升/小时、距离120厘米、转盘转速2500转/分钟）下的静电纺丝制备导电性PCL/PPY/MWCNTs支架。对种植于支架的TM-MSCs施加115V/m、100Hz频率的电刺激，每日10分钟持续7天。方法包括SEM、TEM、FT-IR用于支架表征，免疫荧光和RT-qPCR用于分化分析。
2：4毫升/小时、距离120厘米、转盘转速2500转/分钟）下的静电纺丝制备导电性PCL/PPY/MWCNTs支架。对种植于支架的TM-MSCs施加115V/m、100Hz频率的电刺激，每日10分钟持续7天。方法包括SEM、TEM、FT-IR用于支架表征，免疫荧光和RT-qPCR用于分化分析。 样本选择与数据来源：
2. 样本选择与数据来源：基于改良方案分离并鉴定TM-MSCs。支架由PCL、PPY和MWCNTs制备。数据源自体外细胞培养实验。
3：实验设备与材料清单：
静电纺丝机、扫描电镜（AIS2100, Seron Technology）、透射电镜、傅里叶变换红外光谱仪（Vector 22 Bruker）、恒电位仪/恒电流仪（Zahner/Zennium, Gamry）、电信号发生器（GW, INSTEK AFG-2005）、荧光显微镜（Olympus）、分光光度计（NanoDrop 2000）、酶标仪（ELX800, BioTek）。材料包含PCL、PPY、MWCNTs（Sigma-Aldrich）、溶剂（二甲基甲酰胺、氯仿）、细胞培养基（含FBS的DMEM）、抗体（Santa Cruz Biotechnology）、RNA提取试剂盒（SinaClon）、cDNA合成试剂盒（Takara）、RT-qPCR预混液（AMPLIQON）。
4：5）、荧光显微镜（Olympus）、分光光度计（NanoDrop 2000）、酶标仪（ELX800, BioTek）。材料包含PCL、PPY、MWCNTs（Sigma-Aldrich）、溶剂（二甲基甲酰胺、氯仿）、细胞培养基（含FBS的DMEM）、抗体（Santa Cruz Biotechnology）、RNA提取试剂盒（SinaClon）、cDNA合成试剂盒（Takara）、RT-qPCR预混液（AMPLIQON）。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：静电纺丝制备支架；采用SEM、TEM、FT-IR和电化学研究进行表征；在生物反应器中将细胞种植于支架；施加电刺激；固定细胞并进行SEM与免疫荧光染色；RNA提取、cDNA合成及RT-qPCR分析基因表达；MTT检测细胞活力。
5：数据分析方法：
使用REST?软件结合RT-qPCR数据分析基因表达；统计学显著性水平设为p≤0.05；通过荧光显微镜分析免疫荧光图像；循环伏安法与阻抗谱的电化学数据。
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
Fourier Transform Infrared Spectrometer
Vector 22
Bruker
Investigate chemical properties of the scaffold
立即获取同款设备 -
Electrospinning Machine
Fabrication of fibrous scaffold using high-voltage current
暂无现货
预约到货通知
-
Scanning Electron Microscope
AIS2100
Seron Technology
Determine morphology and diameter of nanofibers; observe cellular adhesion and morphology
暂无现货
预约到货通知
-
Transmission Electron Microscope
Evaluate PPY and MWCNTs dispersion within the fibrous scaffold
暂无现货
预约到货通知
-
Potentiostat-Galvanostat
Zahner/Zennium
Gamry
Record cyclic voltammetry and electrochemical impedance spectroscopy measurements
暂无现货
预约到货通知
-
Electricity Generating Device
AFG-2005
GW, INSTEK
Apply electrical stimulation to cells
暂无现货
预约到货通知
-
Fluorescence Microscope
Olympus
Analyze protein expression in differentiated cells
暂无现货
预约到货通知
-
Spectrophotometer
NanoDrop 2000
Measure purity and quantity of RNA
暂无现货
预约到货通知
-
Microplate Reader
ELX800
BioTeK
Measure MTT absorbance for cell viability assay
暂无现货
预约到货通知
-
Polycaprolactone
Sigma-Aldrich
Component of the conductive scaffold
暂无现货
预约到货通知
-
Polypyrrole
Sigma-Aldrich
Component of the conductive scaffold to enhance electrical properties
暂无现货
预约到货通知
-
Multiwall Carbon Nanotubes
Sigma-Aldrich
Component of the conductive scaffold to increase electrical conductivity
暂无现货
预约到货通知
-
RNA Extraction Kit
RNX-Plus
SinaClon
Extract total RNA from cells
暂无现货
预约到货通知
-
cDNA Synthesis Kit
RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit
Takara
Synthesize cDNA from RNA
暂无现货
预约到货通知
-
RT-qPCR Master Mix
RealQ Plus 2x Master Mix Green/High ROX
AMPLIQON
Perform quantitative real-time polymerase chain reaction
暂无现货
预约到货通知
-
Antibody to Rhodopsin
H-100: sc-15382
Santa Cruz Biotechnology
Detect rhodopsin protein expression in immunofluorescence
暂无现货
预约到货通知
-
Antibody to Recoverin
H-100: sc-28849
Santa Cruz Biotechnology
Detect recoverin protein expression in immunofluorescence
暂无现货
预约到货通知
-
FITC-anti-rabbit IgG
Abcam
Secondary antibody for immunofluorescence detection
暂无现货
预约到货通知
-
登录查看剩余16件设备及参数对照表
查看全部
