研究目的
基于巯基修饰金纳米粒子的双发射荧光反向变化特性，结合农药对乙酰胆碱酯酶（AChE）活性的抑制作用，建立一种农药检测的比率分析法。
研究成果
采用双发射GS-AuNPs构建的比率型生物传感策略对乙酰胆碱酯酶活性及农药检测具有高灵敏度和高效性，其对涕灭威（0.2 nM）和毒死蜱（0.07 nM）的检测限极低。该方法操作简便、快速便捷，适用于蔬菜等实际样品分析，在生物成像等领域也具有应用潜力。
研究不足
该检测方法在碱性条件（pH 8.0）下性能最佳，在酸性环境中可能无效。反应需要固定的20分钟孵育时间，且该方法在蔬菜等复杂真实样品中的基质效应可能影响灵敏度。乙酰胆碱（ATCh）影响荧光的原因尚不明确，表明可能存在未知干扰因素。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用热还原法以1:1比例将谷胱甘肽（GSH）与氯金酸（HAuCl4）合成了双发射金纳米粒子（GS-AuNPs），构建了比率型生物传感策略。该方法利用含巯基化合物与金纳米粒子的相互作用，引起600 nm和800 nm处荧光发射的相反变化。
2：样本选择与数据来源：
样本包括合成的GS-AuNPs、多种硫醇化合物（GSH、半胱氨酸Cys、高半胱氨酸Hcy、巯基丙酸MPA）、乙酰胆碱酯酶（AChE）、乙酰硫代胆碱（ATCh）及农药（涕灭威、毒死蜱）。选用蔬菜样本（辣椒、黄瓜、番茄）进行实际应用测试。
3：实验设备与材料清单：
设备包含安捷伦Cary 60紫外-可见分光光度计、Quanta Master 400光谱仪、JEM-2100F透射电镜、MOS-500圆二色光谱仪。材料包括HAuCl4·3H2O、GSH、AChE、ATCh、农药、HEPES缓冲液。
4：2O、GSH、AChE、ATCh、农药、HEPES缓冲液。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：GS-AuNPs合成通过将GSH与HAuCl4混合物在95°C加热35分钟，经离心和超滤纯化。检测时将HEPES缓冲液、ATCh、GS-AuNPs与AChE或农药混合，在37°C孵育20分钟后进行荧光测定。蔬菜样本经HEPES缓冲液浸提并过滤处理。
5：数据分析方法：
在400 nm激发波长下记录500-900 nm范围的荧光光谱。数据分析包括计算荧光强度比值（F600/F800或F800/F600），并采用3σ法则确定检测限（LOD）。
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