一步法制备三金属合金纳米酶催化剂用于鲁米诺-H2O2化学发光及其与miRNA步行机联用检测miRNA-21的应用

摘要： 通过一步还原法合成了PtCuCo三金属合金（PtCuCo-TAs），并系统研究了其化学发光（CL）性能。PtCuCo-TAs对鲁米诺-H?O?体系表现出良好的催化作用?；诖丝⒘艘訮tCuCo-TAs为纳米酶催化剂的miRNA-21检测平台：首先将H1（发夹DNA1）固定在磁珠（MBs）上，miRNA-21存在时H1被打开并与H2（发夹DNA2）杂交，同时miRNA-21末端形成少量碱基互补的"缺口"防止其脱离H1；当加入由探针DNA互补链（cDNA）和标记探针DNA的PtCuCo-TAs（pDNA-PtCuCo-TAs）组成的cpDNA-PtCuCo-TAs时，H1单链区与探针DNA的toehold域反应释放cDNA并捕获pDNA-PtCuCo-TAs。该过程循环后大量pDNA-PtCuCo-TAs被捕获于MBs，经分离洗涤后将沉淀与H?O?加入96孔板并注入鲁米诺溶液，通过PtCuCo-TAs催化鲁米诺-H?O?体系产生CL信号实现miRNA-21定量检测。该平台检测限达0.167 fM，且对其他RNA具有良好的选择性。