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通过共聚焦显微镜和吸附动力学曲线测量乳粉中的有效扩散系数
摘要: 本文描述了一种基于实时可视化荧光染料渗透喷雾干燥乳粉(包括脱脂乳粉、乳蛋白浓缩物和乳清蛋白分离物)单个颗粒的新方法,用于测定乳粉中局部扩散系数。通过向水相中添加聚乙二醇(PEG)作为粘度调节剂(水相罗丹明与PEG的比例分别为1:0、1:1、1:3和1:4)来控制复水过程。利用共聚焦激光扫描显微镜图像分析获得实时有效扩散率数值,并通过光学方法测量颗粒尺寸。结果表明:所有乳粉的复水速率均高度依赖颗粒尺寸,有效扩散率随颗粒尺寸增大呈线性增长,并据此关系计算了所有粒径分布的液相平均有效扩散率。采用Guggenheim-Anderson-de Boer(GAB)水分吸附等温线模型对宽范围水分活度下的水分吸附行为进行模拟。气相体系的有效扩散率显著高于液相体系。本新方法所得结果与既往文献报道基本一致,表明该方法可用于测定单个粉末颗粒的水合情况。
关键词: 显微镜技术,食品粉末,复水,共聚焦,扩散
更新于2025-09-23 21:15:08
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利用近红外二区窗口单光子荧光的共聚焦检测实现厚生物组织中的三维细胞成像
摘要: 近年来,第二近红外光学窗口(NIR-II,900-1700纳米)的荧光成像已成为非侵入式活体成像的首选技术。该波段因自发荧光低且长波长光子散射减弱,可实现穿透深度大、空间分辨率高且背景低的成像效果。本文展示了一种专为NIR-II窗口设计的共聚焦激光扫描显微镜新方案,并通过系列实验验证其卓越的穿透性能:采用峰值发射波长1276纳米的硫化铅量子点标记的HeLa细胞,能穿透3.5毫米厚的0.8%脂质乳剂散射介质清晰成像;首次将市售有机染料IR-1061(发射峰1132纳米)以原始形态用作细胞成像的NIR-II荧光标记物,我们的共聚焦系统可在固定动物软骨中实现深度达800微米的光学切片成像,对IR-1061标记的软骨细胞保持约2微米的优异空间分辨率。
关键词: 散射、近红外二区、分辨率、穿透深度、共聚焦
更新于2025-09-23 22:53:41
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阴茎癌的共聚焦激光内镜活体组织光学活检
摘要: 引言:阴茎癌的手术治疗取决于精确的切缘评估和分期。先进的光学成像技术可能改善阴茎活检和器官保留治疗。我们评估了共聚焦激光显微内镜用于术中评估良恶性阴茎组织的可行性。 患者与方法:经机构审查委员会批准,招募11例患者(9例疑似阴茎癌患者和2例健康对照)。所有受试者接受1-2次共聚焦激光显微内镜检查(使用2.6毫米光纤探头),共完成13次成像操作。成像前约3分钟静脉注射荧光素作为造影剂?;袢』钐澹╪=12)和离体(n=6)成像视频序列,包括正常龟头、可疑病变及手术切缘。图像经处理、标注、特征分析后与标准苏木精-伊红组织病理学结果对照。 结果:未报告与成像相关的不良事件。共聚焦激光显微内镜可识别良恶性阴茎组织的鉴别特征:正常皮肤细胞大小形态均一,具有与鳞状上皮相符的清晰胞质膜;恶性病变表现为大小形态不一的杂乱拥挤细胞,缺乏清晰胞质膜,呈现模糊虫蚀样外观。可辨识正常与异常鳞状上皮的过渡区域。 结论:本研究首次证实术中共聚焦激光显微内镜用于阴茎癌光学活检的可行性。待进一步评估后,该技术或可作为阴茎癌管理中传统冷冻切片病理学的辅助或替代手段。
关键词: 手术、显微镜检查、共聚焦、阴茎肿瘤、计算机辅助
更新于2025-09-12 10:27:22
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通过共聚焦激光扫描显微镜筛选眼部制剂的整眼灌注模型
摘要: 多种生理和解剖学屏障使得眼部给药极具挑战性。因此,需要更优的体外筛选模型来快速评估制剂配方。本研究设计了一种简易全眼灌注模型,并探索其通过共聚焦激光扫描显微镜筛选全角膜穿透靶向制剂的适用性。采用溶剂扩散蒸发技术制备了基于PEG-胆钙化醇的整合素靶向香豆素-6胶束(TC6M)与非靶向香豆素-6胶束(NTC6M)。NTC6M和TC6M制剂的粒径分别为23.5±5 nm和28.5±6 nm,渗透压为294-300 mOsml/Kg。使用猪眼建立全眼灌注模型,将TC6M与NTC6M滴入离体猪眼及新西兰白兔眼表。取实验眼角膜通过共聚焦显微镜分析香豆素-6的穿透情况。载药胶束粒径均小于50 nm:NTC6M在猪眼角膜深层(达500 μm)及兔角膜(达50 μm)均有穿透;而TC6M表现出更优滞留性,在猪眼表层(50 μm深度)及兔眼表层(20 μm深度)呈现更高荧光强度。该研究成功验证了全眼灌注模型在制剂初步筛选中的应用价值,结合共聚焦显微镜技术可成为眼科制剂快速筛选与优化的有效工具。
关键词: 香豆素-6,共聚焦,胶束,灌注模型,眼部
更新于2025-09-11 14:15:04
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利用显色底物在斑马鱼中进行双色荧光原位杂交
摘要: 双色荧光原位杂交(FISH)是广泛用于比较基因相对表达模式的技术。现有双色FISH方案在检测弱表达转录本或监测反应过程中信号强度与背景水平方面存在不足。本文描述了一种改进的FISH方案,采用常规高灵敏度显色底物硝基蓝四氮唑(NBT)/5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)和Vector Red对斑马鱼胚胎进行染色。该方案通过结合碱性磷酸酶的长时反应性、两种显色反应过程的监测优势以及后续高分辨率荧光成像能力,显著提升了现有FISH技术。尽管在斑马鱼中测试,类似方法预期适用于任何模式生物的原位杂交研究。
关键词: BCIP、双色、Vector Red、共聚焦、NBT、斑马鱼、荧光原位杂交、FISH
更新于2025-09-09 09:28:46