基于FRET的双通道荧光探针，通过多色成像检测内源/外源性H2O2/H2S的形成

摘要： 我们开发了一种基于FRET的荧光探针(PHS1)，该探针由香豆素和萘酰亚胺两种不同荧光团组合而成，可通过多色成像同时检测活细胞中外源性和内源性H2S与H2O2。探针PHS1中萘酰亚胺的紫外吸收峰与香豆素的发射光谱带精确重叠，使其能通过FRET成像获取双分析物的自校准信息。在H2O2存在下，探针PHS1的紫外-可见吸收(λabs 390 nm)和荧光发射(λem 460 nm)分别增强约35倍和15倍，同时可通过550 nm处发射强度的提升来估算H2S水平。该探针对包括pH 4-9.5在内的多种分析物表现出高度稳定性，细胞活性检测数据表明其对癌细胞无毒性，这种无毒特性使其适用于癌细胞标记。PHS1能通过蓝光、绿光及基于FRET的绿色通道成像，检测癌细胞中内源性H2O2、H2S及H2O2/H2S复合水平。作为独特探针，PHS1通过提供癌细胞中双分析物(H2S、H2O2)水平信息，具有癌症诊断的应用潜力。