研究目的
为了展示共聚焦和STED显微镜技术如何利用短链荧光标记寡核苷酸（这些寡核苷酸会短暂结合于连接在蛋白质特异性抗体上的互补寡核苷酸），从而规避共价标记所产生的光漂白问题。
研究成果
该研究成功证明，基于DNA的可交换荧光标记物能规避受激发射损耗显微镜中的光漂白问题，从而实现全细胞的高质量多色三维成像。该方法为超分辨率成像提供了一种可最大限度减少光漂白效应的简便高效方案。
研究不足
该研究仅限于体外细胞成像，并未深入探索活细胞成像。傅里叶环相关分析表明，动态标记的分辨率略低于共价标记。
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基于DNA标记抗体的细胞内蛋白质特异性、多色及三维STED成像
DOI：10.1002/anie.201910115
期刊：Angewandte Chemie International Edition
出版年份：2019
更新时间：2025-09-11 14:15:04
摘要：
光漂白是荧光显微镜面临的主要挑战，尤其是在使用高强度激发光时。这可能导致信噪比和空间分辨率下降，从而限制了可从图像中提取的信息量。通过采用可交换标记物（这些标记物能短暂结合目标物后又解离，从而用储备池中的完整标记物替换已破坏的标记物），可以规避光漂白问题。本研究展示了基于短荧光标记寡核苷酸的共聚焦与STED显微镜技术——这些寡核苷酸能短暂结合附着于蛋白质特异性抗体的互补寡核苷酸。在DNA-STED成像中，荧光标记物的持续交换有效规避了共价标记物产生的光漂白现象。实验证明该技术适用于全细胞靶向双色STED成像。
作者：
Christoph Spahn，Florian Hurter，Mathilda Glaesmann，Christos Karathanasis，Marko Lampe，Mike Heilemann
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