研究目的
开发一个分析平台,能够在无需分离或提纯的复杂基质中,对通常难以检测的中性脂质(特别是生物组织中的甘油三酯)进行深入分析。
研究成果
与MALDI相比,NAPA-LDI-MSI对甘油三酯具有更高的电离效率,而MALDI在磷脂分析方面更具优势。两种平台的互补使用可最大化质谱成像实验中的脂质分子覆盖范围,为研究疾病、感染、代谢等领域的脂质提供可能。
研究不足
该研究强调了在成功进行质谱成像(MSI)时,将纳米颗粒均匀沉积到组织表面所面临的挑战——这可能导致基质或纳米颗粒沉积不均,进而造成分析物空间分布不准确。
1:实验设计与方法选择
本研究通过硅纳米柱阵列(NAPA)基底和基质辅助激光解吸电离(MALDI)技术,比较甘油三酯(TGs)与磷脂酰胆碱(PCs)的电离效率。其理论依据是NAPA对TGs的选择性电离及MALDI对PCs的选择性电离。
2:样本选择与数据来源
使用甘油三酯(16:0/16:0/16:0)和磷脂酰胆碱(18:1/18:1)的脂质标准品,以及小鼠肺组织和人皮肤组织切片。数据通过MALDI-LTQ-Orbitrap XL质谱仪获取。
3:实验设备与材料清单
MALDI基质2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、LC-MS级溶剂、脂质标准品、硅纳米柱阵列(NAPA)基底、MALDI-LTQ-Orbitrap XL质谱仪。
4:实验流程与操作步骤
将脂质标准品制备后沉积于NAPA微孔或不锈钢样品板进行MALDI分析;组织切片冷冻固定于NAPA成像芯片或载玻片进行MALDI分析。通过质谱仪获取并处理成像数据。
5:数据分析方法
数据分析包括比较NAPA-LDI-MS与MALDI-MS(有无乙酸钠添加)获得的TGs和PCs信号强度,同时分析检测到的物种数量及其在组织切片中的分布情况。
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Cryomicrotome
CM1800
Leica Microsystems Inc.
Sectioning of tissue samples for mass spectrometry imaging
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MALDI-LTQ-Orbitrap XL mass spectrometer
LTQ-Orbitrap XL
Thermo Scientific
Mass spectrometry imaging of lipids in biological tissues
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MALDI matrix for mass spectrometry imaging
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TG(16:0/16:0/16:0) and PC(18:1/18:1)
Avanti Polar Lipids, Inc.
Standards for mass spectrometry analysis
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Silicon nanopost array (NAPA) substrates
Matrix-free LDI platform for selective ionization of TGs
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TS-100D
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Application of MALDI matrix to tissue sections
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