研究目的
基于银纳米颗粒可控生长，利用碱性磷酸酶介导的等离子体ELISA对沙丁胺醇（SAL）进行高灵敏度检测的研究。
研究成果
建立了一种基于直接竞争性等离子体ELISA的高灵敏度SAL检测免疫分析方法，其检测限为26.14 pg/mL。该方法为分析动物源性食品或饮用水中的小分子污染物提供了一种有前景的技术。
研究不足
该方法的特异性直接与抗体的特异性相关。对于不同的样品基质，该方法可能需要进行优化。
1：实验设计与方法选择：
将ALP介导的AgNPs可控生长技术应用于SAL检测的直接竞争型等离子体ELISA，并采用点击化学法合成SAL-Bio。
2：样本选择与数据来源：
用10%甲醇/PBS缓冲液将SAL标准品稀释至0.1 ng/mL至500 ng/mL的终浓度。
3：1 ng/mL至500 ng/mL的终浓度。 实验仪器与材料清单：
3. 实验仪器与材料清单：包括硝酸银、硼氢化钠、氢氧化钠、甲醇、SAL、克伦特罗、特布他林、己烯雌酚、HATU、DIPEA、牛血清白蛋白、卵清蛋白、碱性磷酸酶、SA-ALP、AAP、PBS缓冲液、人工尿液、SAL多克隆抗体、96孔聚苯乙烯板及48孔板。
4：实验步骤与操作流程：
预封闭96孔板并包被捕获抗体，加入SAL标准品和SAL-Bio孵育洗涤，加入SA-ALP孵育洗涤，加入AAP反应后转移至含AgNPs/Ag+溶液的另一孔板，测定A400值。
5：数据分析方法：
通过酶标仪记录400 nm吸光度（A400），标准曲线显示A400与SAL浓度呈良好线性关系。
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AgNO3
Sigma-Aldrich, Inc.
Used for the synthesis of silver nanoparticles (AgNPs).
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NaBH4
Sigma-Aldrich, Inc.
Used as a reducing agent in the synthesis of AgNPs.
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NaOH
Sigma-Aldrich, Inc.
Used to adjust the pH of the solution.
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methanol
Sigma-Aldrich, Inc.
Used as a solvent in the synthesis of SAL-Bio.
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SAL polyclonal antibody
B180517
Bersee (Beijing, China)
Used as capture antibodies in the immunoassay.
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SA-ALP
Beijing Bioss Biosynthesis Biotechnology Co., Ltd.
Alkaline phosphatase-conjugated streptavidin used in the immunoassay.
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96-well polystyrene plates
Thermofisher Scientific
Used for the immunoassay.
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48-well plates
Thermofisher Scientific
Used for the immunoassay.
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TU1901 UV-visible spectrophotometer
TU1901
Used to record the UV-Vis absorption spectrum.
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Gen5 microplate reader
Gen5
BioTek
Used to record the absorbance of the microplates.
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