研究目的
利用原子力显微镜(AFM)和近场扫描光学显微镜(NSOM)等高分辨率显微技术,探索更精确的细胞膜结构及膜上生物分子的详细功能。
研究成果
原子力显微镜-单分子力谱(AFM-SMFS)、原子力显微镜-拓扑识别(AFM-TREC)和近场扫描光学显微镜(NSOM)是研究细胞膜上生物分子分布的原位单分子检测强有力技术,为理解膜生物分子在生物现象中的作用和机制提供了洞见。
研究不足
原子力显微镜(AFM)和近场扫描光学显微镜(NSOM)是受限于表面检测的技术,无法对细胞内部分子进行成像。AFM的时间分辨率限制了其对细胞膜生物分子动态过程的研究。NSOM需要荧光标记物才能检测生物分子。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用原子力显微镜(AFM)和近场扫描光学显微镜(NSOM)对细胞膜生物分子进行高分辨率成像。AFM通过测量悬臂梁偏转实现单分子检测,而NSOM可同步获取高分辨率形貌图与荧光图像。
2:样本选择与数据来源:
研究聚焦于细菌与哺乳动物细胞的细胞膜,利用特异性配体及荧光标记物进行生物分子检测。
3:实验设备与材料清单:
功能化特异性配体的AFM探针、小孔径NSOM探针及荧光标记物。
4:实验流程与操作步骤:
AFM探针配体功能化处理、细胞表面AFM/NSOM扫描、生物分子分布与相互作用数据采集。
5:数据分析方法:
通过AFM力-距离曲线及NSOM荧光信号分析,绘制生物分子分布与相互作用图谱。
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