研究目的
利用基于FRET机制的比率荧光传感器组件,从众多相关生物分子中检测并区分半胱氨酸(Cys)氨基酸,用于多种疾病的临床诊断。
研究成果
开发了一种用于高选择性检测半胱氨酸的比率荧光传感器组件,其原理是在加入半胱氨酸后消除碳点与萘酰亚胺之间的FRET机制。该传感器在较高剂量下具有可接受的细胞毒性,显示出在临床诊断和细胞成像方面的潜力。
研究不足
该传感器组件在高浓度(100微克/毫升)下表现出较低的细胞毒性,这限制了其在更高剂量下的使用。碳点发光的确切机制仍不确定。
1:实验设计与方法选择:
基于FRET机制,通过将碳点(CDs)、金和萘酰亚胺衍生物(L1)嵌入单一比率荧光传感器组件中完成设计。
2:样本选择与数据来源:
采用水热法以柠檬酸和乙二胺合成CDs,L1通过多步反应合成。
3:实验设备与材料清单:
化学品购自Sigma Aldrich、Avra Synthesis和Hi-Media;仪器包括Jeol核磁共振仪、Shimadzu UV-2400紫外分光光度计、Perkin Elmer LS 55荧光分光光度计、Hitachi透射电镜及Bruker Tensor 27光谱仪。
4:实验流程与操作步骤:
在CDs和L1存在下通过原位还原金盐制备金纳米颗粒,完成传感器组件制备;通过向传感器溶液中添加半胱氨酸(Cys)并记录荧光信号变化进行检测研究。
5:数据分析方法:
通过分析两个不同波长处的荧光发射变化确定Cys的存在。
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获取完整内容-
1, 8-naphthalic anhydride
Sigma Aldrich
Used in the synthesis of the naphthalimide derivative (L1).
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citric acid
Avra Synthesis
Used in the synthesis of carbon dots (CDs).
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gold
Sigma Aldrich
Used as a solid support in the sensor assembly.
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Fetal bovine serum (FBS)
Hi-Media
Used in cell culture for cytotoxicity assay.
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DMEM
Hi-Media
Used in cell culture for cytotoxicity assay.
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DMSO
Hi-Media
Used in cell culture for cytotoxicity assay.
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