研究目的
开发一种基于液晶传感平台的灵敏、选择性且无需标记的L-苯丙氨酸（L-Phe）检测方法，该方法利用L-Phe对碱性磷酸酶（ALP）的抑制作用。
研究成果
基于液晶的传感平台通过抑制碱性磷酸酶（ALP），成功实现了对L-苯丙氨酸的高灵敏度、高选择性检测，检测限低至1皮克/毫升。该平台在灵敏度和选择性方面优于现有方法，在尿液样本中展现出临床诊断苯丙酮尿症的实际应用价值。这一方法为开发稳健的无标记L-苯丙氨酸检测探针开辟了道路。
研究不足
传感器的灵敏度可能受pH值和离子强度变化的影响，需针对不同条件进行优化。该方法依赖于L-苯丙氨酸对碱性磷酸酶的特异性抑制作用，这一过程可能受到其他抑制剂或环境因素的干扰。SMP层的稳定性及酶促反应可能存在时间依赖性，从而限制其实时应用。
1：实验设计与方法选择：
本研究设计了一种液晶（LC）传感平台，利用单十二烷基磷酸钠（SMP）修饰水/LC界面，诱导液晶呈现偏光下呈暗色的垂直排列。碱性磷酸酶（ALP）水解SMP后，排列转变为平面态并呈现亮色。L-苯丙氨酸（L-Phe）通过抑制ALP阻止该转变，维持暗色外观。基于此光学响应实现检测。
2：样本选择与数据来源：
样本包含牛肠黏膜来源的ALP、多种氨基酸（如L-Phe、L-甲硫氨酸、L-酪氨酸）及健康志愿者尿液样本。溶液配制于Tris-HCl缓冲液（TBS，pH 8.0）中。
3：0）中。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：关键材料包括SMP、ALP、氨基酸、向列相液晶4-氰基-4'-戊基联苯（5CB）、辛基三氯硅烷（OTS）、铜网载玻片及缓冲液。设备含偏光显微镜（XPF-800C，天星）、数码相机（TK-9301EC，JVC）、pH计（PHS-3C，精科）及等温滴定量热仪（Microcal VP-ITC）。
4：实验流程与操作步骤：
制备OTS包被载玻片，将5CB分布于OTS载玻片的铜网上形成光学检测池。引入含SMP、ALP、L-Phe的水相混合溶液至界面，定时采集光学图像并计算亮区覆盖率。通过等温滴定量热法测定抑制作用强度。
5：数据分析方法：
采用Photoshop分析光学图像计算亮区覆盖率；利用ITC数据确定解离常数（KD）。统计分析要求实验重复至少三次。
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获取完整内容-
Isothermal Titration Calorimetry Apparatus
Microcal VP-ITC
Microcal
Used to perform isothermal titration calorimetry measurements to quantify the inhibition of ALP by L-Phe.
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Polarized Light Microscope
XPF-800C
Tianxing
Used to collect optical images of liquid crystals under polarized light.
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Digital Camera
TK-9301EC
JVC
Attached to the microscope to capture digital images of the liquid crystal samples.
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pH Meter
PHS-3C
Jingmikexue
Used to adjust and measure the pH of aqueous solutions in the experiments.
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Copper Specimen Grid
75 mesh
GILDER
Used as a support for the liquid crystal films in the optical cells, with specific dimensions to hold the LC.
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