研究目的
评估非平衡大气压等离子体（NEAPP）直接暴露对包括脂质、蛋白质和核酸在内的生物分子的影响，并将这些氧化修饰标准化，以用于潜在的生物医学应用，特别是在癌症治疗中。
研究成果
直接暴露于NEAPP会以剂量依赖的方式对生物分子（包括脂质、蛋白质和DNA）同时造成氧化损伤和紫外线特异性损伤。羟基自由基是主要效应因子，且该损伤可进行位点特异性控制。这表明其在癌症治疗中具有潜在应用价值，例如根除表面癌细胞，但临床转化仍需进一步研究。
研究不足
NEAPP诱导的氧化应激相对温和，因为谷胱甘肽水平未显著下降。该研究聚焦于体外和离体模型，可能无法完全复现体内环境。其作用深度仅限于组织内数毫米范围，仍需进一步研究以阐明DNA修复机制及所产生活性物质的具体组分。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用高电子密度的NEAPP装置产生活性粒子。运用自由基生物学中的成熟技术（如ESR自旋捕获、分光光度法、ELISA和免疫组织化学）检测氧化及紫外线诱导的修饰作用。
2：样本选择与数据来源：
样本包括亚油酸、α-亚麻酸、磷脂酰胆碱、维生素E剥离玉米油的脂质体、大鼠肝匀浆、质粒DNA和大鼠基因组DNA。动物实验使用Fischer-344与Brown-Norway品系杂交的F1代大鼠。
3：实验设备与材料清单：
关键设备包含NEAPP装置、ESR光谱仪（JEOL FR-30）、分光光度计（GeneQuant 1300）、荧光检测系统（PowerScan4）及成像系统（BZ-9000）?；芳笆约梁胁晒鹤远嗉夜┯ι蹋ㄈ鏞xford Biomedical Research、Wako、Sigma-Aldrich）。
4：0）、分光光度计（GeneQuant 1300）、荧光检测系统（PowerScan4）及成像系统（BZ-9000）?；芳笆约梁胁晒鹤远嗉夜┯ι蹋ㄈ鏞xford Biomedical Research、Wako、Sigma-Aldrich）。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：样本在96孔板中暴露于NEAPP特定时长（如30秒至5分钟）。暴露后进行以下分析：ESR检测羟基自由基、234纳米吸光度测定共轭二烯、TBARS法检测脂质过氧化、谷胱甘肽测定、免疫组织化学检测蛋白质修饰、凝胶电泳检测DNA链断裂、ELISA检测8-OHdG和CPDs。
5：数据分析方法：
采用GraphPad Prism软件进行单因素方差分析和独立样本t检验。数据以均值±标准误表示，显著性水平p<0.05。
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获取完整内容-
ESR Spectrometer
FR-30
JEOL
Used for electron spin resonance spin-trapping to detect hydroxyl radicals generated by NEAPP.
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96-well Plate
Clear flat bottom
Corning
Used for holding samples during NEAPP exposure.
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Spectrophotometer
GeneQuant 1300
GE Healthcare Life Sciences
Measured absorbance at 234 nm for conjugated dienes in fatty acids.
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Fluorometric Assay System
PowerScan4
DS Pharma Biomedical
Used for fluorometric assay of TBARS in lipid samples.
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Imaging System
BZ-9000
Keyence
Analyzed fluorescent images from immunohistochemical staining.
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NEAPP Device
Generated non-equilibrium atmospheric pressure plasma for exposure experiments.
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