研究目的
开发并表征完全有机、单分散的树状大分子纳米颗粒,用于结合双光子成像与光动力治疗,具有高双光子吸收、荧光及单线态氧生成能力,且在黑暗和日光下均无毒性。
研究成果
树枝状纳米颗粒具有较高的双光子吸收、荧光和单线态氧生成能力,使其在双光子成像和光动力治疗中表现出色。它们在黑暗和日光下均无毒性,克服了光动力治疗中的常见缺陷。未来研究应聚焦于体内应用及表面功能化以实现靶向治疗。
研究不足
该研究仅限于MCF-7细胞的体外实验,未涉及体内疗效及潜在副作用。合成过程复杂且可能难以规?;?。高代数树枝状聚合物中荧光量子产率和单线态氧生成的下降,表明可能存在影响性能的生色团间相互作用。
1:实验设计与方法选择:
本研究通过合成双功能四极染料并将其共价接枝到磷基树枝状大分子上制备纳米颗粒。采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、单线态氧量子产率测定及双光子吸收截面测量等方法分析光物理性质。细胞实验包括共聚焦显微镜成像及不同条件下MTS/MTT法检测细胞毒性。
2:样本选择与数据来源:
体外实验使用人乳腺癌MCF-7细胞。样本包含合成的染料(10)、第一代树枝状大分子(2-G1)及含水溶性基团的第二代树枝状大分子(2-G2)。
3:0)、第一代树枝状大分子(2-G1)及含水溶性基团的第二代树枝状大分子(2-G2)。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备包括Jasco V-570分光光度计、爱丁堡FLS920光谱仪、HORIBA Jobin Yvon Fluorolog-3、双光子测量用钛宝石激光器、蔡司LSM 780共聚焦显微镜(配备Chameleon Ultra II激光器)、布鲁克Avance AV 300核磁共振仪、Micromass MS/MS ZABSpec TOF质谱仪及各类合成用化学试剂。
4:双光子测量用钛宝石激光器、蔡司LSM 780共聚焦显微镜(配备Chameleon Ultra II激光器)、布鲁克Avance AV 300核磁共振仪、Micromass MS/MS ZABSpec TOF质谱仪及各类合成用化学试剂。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:合成过程包含Mitsunobu缩合、Wittig反应、Sonogashira偶联及树枝状大分子功能化等多步反应。光物理测量在四氢呋喃或二氯甲烷中进行。细胞实验包括染料孵育、Hoechst 33342和CellMask染色标记、激光照射及MTS/MTT法评估细胞存活率。
5:数据分析方法:
采用标准光谱技术分析数据,通过重卷积拟合测定荧光寿命,并对细胞存活率实验数据进行统计分析(均值±标准差)。
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Spectrometer
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Horiba Jobin Yvon
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Two-photon excitation for fluorescence measurements
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