研究目的
开发一种用于监测哺乳动物细胞中细胞器形态和动态的新材料,这对细胞状态判定和疾病诊断具有重要意义,并探索其在药物递送方面的潜力。
研究成果
EV-BSA FPNs作为双细胞器成像工具和药物载体具有良好效果,展现出优异的生物相容性、光稳定性和对癌细胞的特异性细胞毒性。它们代表了生物非生物杂化材料的新方法,在未来诊断和治疗应用中具有潜力。
研究不足
药物释放速率较高且对pH不敏感,这可能限制其在控释应用中的使用。酶消化可逆转组装过程,可能影响稳定性。该研究主要采用体外模型和初步体内试验,需要在更复杂的生物系统中进一步验证。
1:实验设计与方法选择:
本研究通过乙基紫(EV)与加热牛血清白蛋白(h-BSA)的超分子相互作用,设计并合成了用于生物成像和药物递送的荧光纳米载体EV-BSA FPNs。方法包括混合液加热、多种光谱与显微技术表征及生物学实验。
2:样本选择与数据来源:
样本包含BSA、EV及其混合物;使用细胞系(HeLa、HEK-293、MEF、L929、CT-26)进行成像和细胞毒性测试。数据源自实验测量。
3:MEF、LCT-26)进行成像和细胞毒性测试。数据源自实验测量。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备包括透射电镜(JEM-2100)、Zetasizer Nano ZS、共聚焦显微镜(LSM710)、分光光度计(UV-3600、5301PC)、PAGE系统等。材料包含BSA、EV、CPT-11、细胞培养试剂及缓冲液。
4:0)、Zetasizer Nano ZS、共聚焦显微镜(LSM710)、分光光度计(UV-5301PC)、PAGE系统等。材料包含BSA、EV、CPT-细胞培养试剂及缓冲液。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:合成过程涉及BSA与EV混合、100°C加热20分钟、透析及储存。表征手段包括荧光光谱、ζ电位、TEM、PAGE、酶活性检测、细胞成像、细胞毒性测试(MTT法)及药物释放研究。
5:数据分析方法:
采用统计方法(如细胞毒性的Student's t检验)、光谱分析及成像软件(如显微镜专用Zen软件)处理数据。
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Transmission Electron Microscope
JEM-2100
JEOL
Used for imaging the morphology and size of EV-BSA FPNs.
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Zetasizer Nano ZS
Zetasizer Nano ZS
Malvern Panalytical
Used for measuring the ζ potential of samples.
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Confocal Laser Scanning Microscope
LSM710
ZEISS
Used for taking confocal images of cells.
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Spectrophotometer
UV-3600
Shimadzu
Used for obtaining ultraviolet spectra.
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Spectrophotometer
5301PC
Shimadzu
Used for obtaining fluorescence spectra.
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FLS920 PL Quantum Yield Spectrometer
FLS920
Edinburgh Instruments
Used for measuring fluorescence quantum yields.
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ZEN-3600 Nanoparticle Size Analyzer
ZEN-3600
Malvern Instruments
Used for measuring ζ potentials.
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AVANCEIII500 FT NMR System
AVANCEIII500
Bruker
Used for diffusion-ordered spectroscopy (DOSY) analysis.
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Integrated Multifunctional Imaging System
ChemiScope 6000 Pro Touch
Qinxiang Scientific Instrument
Used for taking macro-images.
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Luminescence Lifetime Spectrometer
Edinburgh Instruments
Used for recording fluorescence lifetime decay profiles.
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Incubator Shaker
IS-RDS3
Crystal
Used to mix and heat samples.
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Rolling Incubator
QB-228
Kylin-Bell Lab Instruments Co. Ltd
Used to mix and heat samples.
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Constant Temperature Metal Bath
Hangzhou Bioer Technology Co. Ltd
Used to heat samples.
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Microplate Reader
ELX-808
Biotek
Used for recording absorbance in cytotoxicity tests.
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PAGE System
CAVOY Power B
Used for SDS-PAGE and native-PAGE experiments.
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